Membuat Sediaan Darah Malaria

Membuat sediaan darah malaria Dr. riz Dr. ri z Moh Mo h Abrar  riz Edit by M. Fithri rahmani

Membuat sediaan darah malaria 1.

2.

Cara Pembuatan sediaan darah (SD) Cara pewarnaan SD dengan cat Giemsa

1.

Cara Pembuatan sediaan darah (SD) 

 Terlebih dahulu di lakukan pembuatan sediaan tipis dan sediaan tebal



Perhatikan kebersihan dari alat – alat dan bahan pada pembuatan sediaan.



Pemeriksaan malaria ini di perlukan darah tepi yang diambil dari ujung jari atau daun telinga yang telah dibersihkan dengan kapas berlakohol 70% sbg desinfektan dan pembersih zat lemak pada permukaan kulit.

Lanjutan……… 

Gunakan lencet atau jarum Franke secara cepat dan ckup dalam (jng terlalu dlm).

Rasional: agar aliran darahnya lancar, karena kalau tusukan tidak cukup dalam, maka darah dapat keluar  hanya dengan pemujitan jari. 

Pembuatan harus dilakukan dengan cepat dan tepat, karena darah yang keluar akan cepat membeku.



Bila menggunakan darah vena maka tambahkan zat anti koagolan (misalnya; heparin), cara ini sering berakibat distorsi parasit.

a.

Cara membuat SD tipis 

SD harus benar – benar tipis, dng satu lapis sel – sel darah yng tersebar merata dan tidak saling menumpuk.



Pada SD tipis plasmodium dpt di lihat, sedangkan pada sediaan tebal tidak dapt dilihat dng detail.

Caranya: 

Satu tetes darah ditempatkan pd ujung sebelah kanan dari kaca SD



Dengan segera SD kaca yang lain (spreader) letakkan ujungnya di sebelah kiri dari tetesan darah tadi.

Lanjutan………. 

Geserkan ke kanan spreader sampai menyentuh tetesan darah sehingga tetesan darah akan menempati pertemuan kedua kaca SD tersebut.



Lalu kedua kaca SD ini dibuat sudut 30-45 0 serta dng kecepatan tetap kaca spreader di geser ke kiri, sehingga didaptkan SD darah yg cukup tipis merata.



Setelah itu SD darah di keringkan pada temperatur kamar, dan lakukan pewarnaan.

Catatan : SD yg baik berbentuk seperti ekor  komet.

 b. Cara membuat SD tebal

Caranya: 

2 atau 3 tetes darah ditempatkan pd SD yg bersih,



Ratakan menjadi sebuah bulatan dng diameter 1 cm.



Di keringkan dalam temperatur kamar selama + 1 jam



Lakukan pewarnaan

Catatan : Dlm pengeringan tidak blh di panasi karena tindakan ini menyebabkan eritrosit skur dihemolisis pada proses  pewarnaan.



Pewarnaan tidak lebih dr 24 jam setelah kering, karena  jika terlalu lama didiamkan eritrosit sukar dihemolisist  pada proses pewarnaannya.



Pewarnaan Sediaan

Cara pewarnaan dengan cat giemsa a.

Bahan –bahan yang di perlukan : 

SD tipis/tebal yg sudah kering



Larutan buffer (penyangga) untuk zat hemolisis eritrosit



Metil alkohol murni untuk memfiksasi



Larutan Giemsa: dibuat dari cat giemsa induk  diencerkan 30 – 50 kali dng lautan pengencer ph 7,2.



Campurkan zat Giemsa induk satu bagian dalam 30 – 50 bagian larutan pengencer.



Larutan pencuci (air leiding)

1.

Cara pewarnaan dengan cat Giemsa untuk  SD tipis 



SD tipis yg sudah kering difiksasi dng metil-alkohol murni selama 1 – 5 menit. Cuci dng air mengalir (air pipa), kemudian keringkan  pd temperatur kamar.



Letakkan SD pd raka yng datar untuk di genangi larutan Giemsa selama 30 – 60 menit.



Cuci sebentar dng air mengalir.



Keringkan pada temperatur kamar dan sediaan I sandarkan miring.



Diperiksa di bawah miksroskop dengan lensa obyektif  100x, dan memakai minyak immersi (annisol)

2. Cara pewarnaan dengan cat Giemsa untuk SD tebal SD tebal yg dibuat tidak boleh terlalu tebal dan harus sudah kering. SD tidak difiksasi dahulu, langsung digenangi larutan penyangga selama 5 menit sampai SD menjadi  bening terhemolisis. Keringkan pd temperatur kamar.





Genangi dng larutan Giemsa selama 30 – 50 menit.



Setelah itu dicuci dng air mengalir secara hati – hati



Keringkan dalam temperatur kamar.



Diperiksa di bawah miksroskop dengan lensa obyektif 100x, dan memakai immersi (annisol)

Jika pembuatan SD dan pewarnaanya cukup baik  maka tampak dalam SD tersebut: 

Eritrosit bewarna merah muda



Lekosit berwarna lembayung muda



Protoplasma plasmodium menjadi biru

Butir – butir khromatin khr omatin dlm inti Plasmodium  berwarna merah karmin.



 Thank you banget,,,,,!!!!!!!!!!