LIPID November 23rd, 2010 2010 | Author: annisarosi08 LIPID An Nisa Rosiyana Rosi yana (G84080038)1,Marsudi Siburian 2, dan Waras Nurcholis 3 Mahasiswa Praktikum1, Asisten Praktikum 2, dan Dosen Praktikum 3 Struktur dan Fungsi Biomolekul Departemen Biokimia, FMIPA, IPB 2010 Abstrak
Lipid merupakan senyawa organik organik ayang tidak larut dalam pelarut polar polar dan hanya dalam dalam pelarut organik atau nonpolar. nonpolar. Lipid adalah senyaa senyaa penting yag ada didalam didalam tubuh. Lipid berfungsi sebagai tempat berlangsungnya pertukaran materi, tempat cadangan makanan.dan sebagai pelarut vitamin. Lipid dapat dapat diuji dengan beberapa uji seperti uji kelarutan, uji akrolein, uji ketidakjenuhan, uji ketengikan, kete ngikan, uji Salkowski dan uji Lieberman Buchard. Lipid akan larut pada beberapa pelarut organik seperti eter, kloroform, dan bisa juga beberapa jenis lipid yang larut dalam alkali dan asam pada proses penyabunan.Gliserol penyabunan.Gliserol dalam bentuk bebas dapat mengalami dehidrasi membentuk aldehid akrilat. Ada dua jenis asam lemak yaitu asam lemak jenuh dan asam lemak tidak jenuh. Minyak yang yang dibiarkan terlalu lama akan mengalami ketengikan. Uji Salkowski adalah uji untuk kolesterol. Uji ini bersifat uji kualitatif. Adapun uji kolesterol yang bersifat bersi fat kuantitatif adalah uji Lieberman Buchard. UJi Lieberman Buchard dapat dapat menggunakan instrumen kolorimetri. Pendahuluan
Lipid merupakan senyawa organik berminyak atau berlemak yang tidak larut dalam air, yang dapat diekstrak oleh pelarut nonpolar. Jenis lipid yang paling banyak terdapat di alam ialah lemak atau triasilgliserol yang merupakan bahan bakar bagi hampir semua organisme (Lehninger 1982). Struktur umum asam lemak Lipid mempunyai banyak fungsi dalam tubuh. Lipid berfungsi sebagai tempat cadangan energi yang besar yang tersimpan dalam jaringan adiposa. Lipid sebagai penyusun struktur membran sel yang mengatur aliran material, sebagai hormon yang merupakan pengatur komunikasi antar sel, dan sebagai tempat larut beberapa vitamin. Lipid dibagi menjadi beberapa jenis yaitu asam lemak, gliserida, li pid kompleks, dan nongliserida. Asam lemak terdiri atas asam lemak jenuh dan asam lemak tak jenuh. gliserida terdiri atas gliserida netral dan fosfogliserida, lipid kompleks terdiri atas lipoprotein dan glikolipid, dan non gliserida, terdiri atas sfingolipid, steroid dan malam.
Asam lemak merupakan asam monokarboksilat rantai panjang. Adapun rumus umum dari asam lemak adalah: CH3(CH2)nCOOH
atau
CnH2n+1-COOH
Rentang ukuran dari asam lemak adalah C 12 sampai dengan C 24. Ada dua macam asam lemak yaitu: Asam lemak jenuh ( saturated fatty acid ) atau Asam lemak yang tidak memiliki ikatan rangkap dan Asam lemak tak jenuh (unsaturated fatty acid ) atau asam lemak yang memiliki satu atau lebih ikatan rangkap.
Lipid yang kita peroleh sebagai sumber energi utamanya adalah dari lipid netral, yaitu trigliserid (ester antara gliserol dengan 3 asam lemak). Secara ringkas, hasil dari pencernaan lipid adalah asam lemak dan gliserol, selain itu ada juga yang masih berupa monogliserid. Karena larut dalam air, gliserol masuk sirkulasi portal (vena porta) menuju hati. Asam-as am lemak rantai pendek juga dapat melalui jalur ini. Tujuan praktikum ini adalah untuk mengetahui sifat dan struktur lipid melalui uji kualitatif. Selain itu, untuk mempelajari sifat-sifat lipid melalui beberapa reaksi uji kualitatif untuk lipid. Metode Praktikum
1. Waktu Praktikum Praktikum materi Lipid ini dilakukan Laboratorium Biokimia pada tanggal 12 November 2010 jam 08.00-11.00 WIB. 1. Alat dan Bahan Alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini antara lain: pipet tetes, gelas arloji, tabung reaksi, pipet volumetrik, , gelas piala, tabung reaksi , penangas air dan bulp. Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah air , eter, kloroform, alkohol panas, alkohol dingin, alkali dan asam encer sebagai pelarut. Pereaksi yang digunakan iod Hubl, HCl pekat, serbuk CaCO3, kloroform anhidrat, dan asam sulfat. Bahan uji yang digunakan minyak kelapa, lemak hewan, mentega, margarin, gliserol, asam palmitat, pati, asam stereat, asam oleat, minyak kelapa tengik, dan asam asetat. 1. Prosedur Percobaan Uji kelarutan. Tabung reaksi yang bersih diisi dengan 2 ml pereaksi atau pelarut. Kemudian ditambahkan bahan uji dan tabung dikocok dengan kuat. Amati yang terjadi. Pelarut yang digunakan air, eter, kloroform, alkohol panas, alkohol dingin, alkali dan asam encer. Bahan uji yang diuji minyak kelapa, lemak hewan, mentega, margarin, gliserol, asam palmita t, dan asam stereat, Uji akrolein. Tabung reaksi yang bersih diisi dengan kristal KHSO 4 dan ditambahkan 3-4 tetes bahan uji. Kemudian dipanaskan dengan api kecil terlebih dahulu. Bau yang dihasilkan
di bandingkan antara bau akrolein dengan bau SO 2. Yang terbang dari karbohidrat. Bahan uji yang di ujikan minyak kelapa, lemak hewan, mentega, margarin, gliserol, asam palmitat, pati,dan asam stereat. Uji ketidakjenuhan. Tabung reaksi yang bersih diisi dengan 1 ml bahan uji dan ditambah kloroform sama banyak sampai bahan uji larut. Kemudian ditambah dengan tetesan iod Hubl dan dikocok. Amati perubahan. Bahan uji yang digunakan minyak kelapa, lemak hewan, mentega, margarin, asam palmitat, asam oleat, dan minyak kelapa tengik. Uji ketengikan. Labu Erlenmeyer 100 ml diisi dengan 5 ml bahan uji dan 5 ml HCl pekat dengan hati-hati. Kertas saring yang telah dimasukan kedalam floroglusinol dan sumbat dengan karet. Serbuk CaCO 3 dimasukan kedalam labu Erlenmeyer bersamaan dengan kertas saring dan tutp dengan karet. Kertas saring jangan tercelup kedalam campuran. Diamati selama 20 menit. Bila terjadi warna merah muda maka bahan tersebut tengik. Bahan uji minyak kelapa, lemak hewan, mentega, dan minyak kelapa tengik. Uji Salkowski untuk kolesterol. Tabung reaksi yang bersih diisi dengan beberapa miligram kolesterol dan ditambah dengan 3 ml kloroform anhidrat. Kemudian ditambahkan dengan asam sulfat dengan jumlah yang sama. Jangan dikocok. Amati perubahan warna yang terjadi. Uji Lieberman Buchard untuk kolestorol. Kolesterol dan kloroform (dari i=uji Salkowski) ditambah dengan 10 tetes asam asetat anhidrat dan 2 ml asam sulfat. Kocok perlahan dan dibiarkan beberapa menit. Hasil dan Pembahasan
Lipid merupakan senyawa yang tidak larut dalam air dan hanya akan larut dalam pelarut organik. Lipid tidak akan larut dalam dalam air karena air merupakan senyawa polar sedangkan lipid merupakan senyawa non polar. Sifat kelarutan ini dapat dinyatakan bahwa senyawa polar akan melarutkan senyawa polar. Begitu pun dengan senyawa non polar akan larut dalam pelarut non polar. Uji kelarutan lipid merupakan analisis kelarutan lipid maupun derivat lipid terhadap berbagai macam pelarut (Fachri 2008). Semakin panjang rantai karbon yang dimiliki asam lemak akan mengurangi kelarutannya pada pelarut polar dan akan larut dalam pelarut non polar atau organik. Golongan yang mempunyai rantai karbon yang panjang ini merupakan asam lemak seperi asam palmitat, asam oleat, asam linolenat dan beberapa asam lemak lainnya. Hasil percobaan didapatkan hasil ada beberapa yang larut dalam hasil uji. Semua uji yang diuji dengan air tidak ada yang larut dalam air. Percobaan dengan pelarut et er dan kloroform hampir semua percoban positif hal ini menunjukan bahwa eter dan kloroform merupakan senyawa organik yang dapat melarutkan lemak. Uji kelarutan dengan menggunakan alkohol panas dan alkohol dingin hanya giserol saja yang larut dalam pelarut tersebut. Uji kelarutan dengan menggunakan alkali hanya margarin yang tidak larut dalam pelarut ini. Asam dan basa bereaksi dengan asam lemak pada proses penyabunan. Pada asam lemak ada gugus hidrofilik yang berikatan dengan kepala polar dan gugus hidrofobik yang akan membentuk misel. Asam encer yang direaksikan dengan bahan uji hanya melarutkan glise rol saja. Tabel 1 Uji kelarutan
Bahan Minyak kelapa Lemak hewan Mentega Margarin Gliserol Asam sitrat
Air
Eter
Klorofom
Alkohol panas
Alkohol dingin
Alkali
Asam encer
–
++
+
–
–
++
–
–
++
+
–
–
++
–
++ ++
+ ++ ++ ++
– –
– –
++ ++
++
– – – –
Keterangan : –
— ++
–
+
– ++ +
– – +
–
= Tidak larut
+
= Larut sebagian
++
= Larut
Gliserol dalam bentuk bebas atau yang terdapat dalam bentuk minyak bila mengalami dehidrasi akan membentuk aldehid akrilat yang disebuk juga dengan akrolein (Girindra 1986). Uji ini akan menghasilkan bau yang dihasilkan dari proses pemanasan. Uji ini dilakukan dengan penambahan kristal KHSO 4 berfungsi untuk mendehidrasi lipid agar kandungan senyawa H 2O berkurang. Sehingga dapat menimbulkan bau SO 2 yang terbang dari karbohidrat. Hasil percobaan dengan bahan uji minyak kelapa, gliserol, dan asam oleat memiliki bau seperti pati yang digunakan sebagai standar. Bau yang sama dengan pati menunjukan adanya gliserol dalam bahan uji. Lemak hewan tidak memiliki bau yang sama dengan pati hal ini menunjukan bahwa lemak hewan tidak mengandung gliserol. Begitu pula dengan asam stereat yang tidak berbau dan tidak mengandung gliserol. Tabel 2 Uji akrolein Bahan Minyak kelapa Lemak hewan Gliserol Asam okat Asam stereat Pati Keterangan +
Hasil +
– + +
– + :
–
Keterangan Bau sama dengan pati Bau hewan Bau sama dengan pati Bau sama dengan pati Tidak berbau Bau pati
= Tidak mengandung griserol
= Mengandung gliserol
Asam lemak ada dua jenis berdasarkan ikatan yang dibentuknya yaitu asam lemak jenuh dan asam lemak tidak jenuh. Asam lemak jenuh merupakan asam lemak yang tidak memiliki ikatan rangkap seperti asam maleat, asam palmitat, asam stereat, asam arakidat dan asam lemak lainnya. Sedangkan asam lemak jenuh merupakan asam lemak yang memiliki ikatan
rangkap pada C9 atau C10. Misalnya asam lemak tidak jenuh seperti asam oleat, asam linoleat, asam linolenat dan asam arakidonat. Asam lemak tidak jenuh dapat diadisi oleh golongan halogen. Golongan halogen yang dapat digunakan iodium dalam pereaksi iod Hubl. Iod Hubl berfungsi sebagai indikator perubahan warna. Reaksi positif ketidakjenuhan asam lemak adalah terbentuknya warna merah ketika pereaksi iod Hubl diteteskan ke a sam lemak, lalu warna kembali lagi ke warna awal kuning bening. Warna yang pudar kembali tersebut menunjukkan bahwa terdapat banyak ikatan rangkap pada hidrokarbon asa m lemak (Girindra 1986). Berdasarkan percobaan yang dilakukan ada beberapa asam lemak tidak jenuh pada bahan uji. Bahan uji yang memiliki ikatan rangkap minyak kelapa, minyak kelapa tengik, lemak hewan, mentega dan asam oleat. Minyak kelapa merupakan lemak yang mempunyai ikatan asam lemak palmitat yang merupakan ikatan jenuh dan terdapat ikatan rangkap yang berasal dari asam oleat, yang merupakan kandungan terbanyak dalam mniyak kelapa sehingga menjadikan minyak kelapa termasuk asam lemak tidak jenuh. Minyak kelapaa tengik merupakan asam lemak tidak jenuh yang memiliki banyak ikatan rangkap yang banyak. Karena semakin tengik suatu minyak kelapa maka akan semakin banyak ikatan rangkap yang dimilikinya (Wibowo 2007). Asam oleat merupakan suatu asam lemak yang memiliki atom C sebanyak 18 buah dengan ikatan rangkap pada C-9 dan C-10. Mentega adalah suatu campuran triasilgliserol, beberapa diantarnya mempunyai asam lemak dengan rantai yang relatif pendek. Karena asam lemak dengan rantai yang relatif pendek mempunyai titik leleh yang lebih kecil, asam lemak ini membuat mentega bersifat lumnak pada suhu kamar. Asam stereat memiliki 18 buah atom C dengan ikatan tunggal dan termasuk pada asam lemak jenuh yang bila direaksikan dengan pereaksi iod Hubl akan menghasilkan warna merah. Tabel 3 Uji ketidakjenuhan Bahan Minyak kelapa Minyak tengik Lemak hewan Mentega Margarin Asam stereat Asam oleat Keterangan : – + 7 6 5 4 3
Hasil
– – – – + +
–
Keterangan Kuning-kuning keruh Kuning bening-kuning Putih-putih Kuning-putih Kuning-orange kemerahan Putih-merah Kuning bening-kuning
= Memiliki ikatan lemak tidak jenuh
= Memiliki ikatan lemak jenuh
2 1 Keterangan:
1
= Minyak kelapa
2
= Minyak kelapa tengik
3
= Lemak hewan
4
= Mentega
5
= Blue band
6
= Asam palmitat
7
= Asam oleat
Uji ketengikan untuk menentukan derajat ketengikan dengan mengukur senyawa oksidasi. Ketengikan pada kebanyakan lemak atau minyak menunjukkan bahwa golongan trigliserida tersebut telah teroksidasi oleh oksigen dalam udara bebas. Molekul oksigen dapat bereaksi dengan asam lemak berikatan ganda dan menghasilkan produk kompleks yang menyebabkan timbulnya rasa dan bau menyimpang pada lemak (Lehninger 1982). Uji ketengikan dengan menggunakan kertas saring yang dibasahi dengan larutan floroglusinol, floroglusinol ini berfungsi sebagai sebagi penanda bercak. Bercak positif yang dihasikan akan menghasilkan spot warna merah muda. Perubahan warna ini terbentuk sebagai hasil reaksi antara fluoroglusinol dengan molekul oksigen yang mengoksidasi minyak tersebut (Winarno 1973). Berdasarkan hasil percobaan yang dilakukan minyak kelapa tengik menghasilkan uji yang positif dengan acanya spot warna merah muda. Proses ketengikan terjadi karena penyimapana bahan yang lama sehingga teroksidasi dan membentuk ikatan rangkap yang banyak. Tabel 4 Ketengikan Bahan Minyak kelapa Minyak kelapa tengik Lemak hewan mentega
Warna kertas Cokelat Merah muda
Hasil
– +
Keterangan Tidak tengik Tengik
Cokelat Cokelat
– –
Tidak tengik Tengik
Kolesterol adalah sterol utama pada jaringan hewan. Kolesterol dan senyawa turunannya ester, dengan lemaknya yang berantai panjang adalah komponen penting dari plasma lipoprotein dan dari membran sel luar. Membran sel tumbuhan mengandung sterol jenis yang lain, terutama stigmasterol, yang berbeda dari jenis kolesterol hanya dalam ikatan ganda diantara karbon 22 dan karbon 23. Molekul kolesterol memiliki gugus polar pada bagian kepalanya yaitu gugus hidroksil pada posisi 3. Bagian molekul lainnya merupakan struktur non polar yng relatif kaku (Lehninger 1982). Kolesterol terkonsentrasi dalam otak dan sumsum tulang belakang. Jumlah total kolesterol dalam tubuh manusia rata-rata ilah sekitar 2
ons. Tampaknya ada hubungan antra konsentrasi kolesterol serum darah dan penyakit jantung koroner. Kadar dibawah 200mg/dL dapat diterima, akan tetapi adar diatas 280 mg/dL dapat beresiko tinggi (Hart et all 2003). Uji kolesterol dapat dilakukan dengan dua cara yaitu dengan uji Salkowski dan Lieberman Buchard. Uji Lieberman Buchard merupakan uji kelanjutan dari uji Salkowski. Persamaan kedua uji ini untuk uji kolesterol. Perbedaan kedua uji ini adalah pada uji kualitatif dan kuantitatifnya. Uji Salkowski merupakan uji kualitatif sedangkan uji Lieberman Buchard merupakan uji kuantitatif yang dapat menggunakan kolorimetri sebagai instrumennya. Uji Salkowski dengan menggunakan pereaksi asam sulfat yang ditambahkan berfungsi sebagai pemutus ikatan ester lipid. Apabila dalam sampel tersebut terdapat kolesterol, maka lapisan kolesterol di bagian atas menjadi warna merah. Cincin coklat yang terbentuk merupakan hasil reaksi antara kolesterol dengan asam sulfat pekat (Pramarsh 2008). Hasil percobaan menunjukan positif dengan adanya cincin warna merah pada bagian atas larutan. Uji Liberman Buchard ketika asam sulfat ditambahkan ke dalam campuran yang berisi kolesterol, maka molekul air berpindah dari gugus C-3 kolesterol, kolesterol kemudian teroksidasi membentuk bikolestadienil. Produk ini dikonversi menjadi polimer yang mengandung kromofor yang menghasilkan warna hijau. Penambahan asam asetat anhidrat bertujuan untuk mencairkan asam sulfat (Cook 1958). Hasil uji Lieberman Buchard menunjukan hasil yang positif diliahat dari pwrubahan warna yang terjadi yaitu warna hijau. Tabel 5 Uji kolesterol Uji Salkowski Liberman Buchard
Perubahan warna Keterangan Ditengah jingga di + atas merah Di dasar merah di atas + hjau
Foto
Kesimpulan
Lipid larut pada pelarut eter dan kloroform sedangkan pelarut lainnya hanya ada sebagian lipid tertentu yang larut. Minyak kelapa, minyak kelapa tengik, lemak hewan, mentega dan asam oleat merupakan asam lemak tidak jenuh. Sedangkan margarin dan asam stereat merupaka asam lemak jenuh. Ketengikan terjadi karena adanya oksidasi sehingga jumlah ikatan rangkap bertambah. Uji Salkowski dan uji Liebermen Buchard bernilai positif. Daftar Pustaka
Cook RP. 1958. Cholesterol Chemistry: Biochemistry and Pathology. New York: Academic Press Inc. Fachri AB. 2009. Lemak dan Minyak. [terhubung berkala]. http://boyarieffacgri.blogspot.com/the_nature_has_talked/Lemak_dan_minyak.htm. [18 November 2010].
Hart dkk. 2003. Kimia Organik: Suatu Kuliah Singkat . Achmadi SS, penerjemah. Jakarta: Erlangga. Terjemahan dari: Organic Chemistry. Girindra A. 1986. Biokimia I . Jakarta: Gramedia Lehninger AL. 1982. Dasar-Dasar Biokimia Jilid 1. Thenawijaya M, penerjemah. Jakarta: Erlangga. Terjemahan dari: Principles of Biochemistry. Pramarsh. 2008. Test for Cholesterol. [terhubung berkala]. http://www.planetayurveda.com/cholesterol_remedies.html. [18 November 2010]. Wibowo. 2007. Virgin Coconut Oil (VCO). [terhubung berkala]. http://suaramerdeka.html. [17 November 2010. Winarno F. 1973. Teknologi Pangan. Bogor: IPB Pr.
