LAPORAN RESMI PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA II HALAMAN JUDUL MATERI PROTEIN
Disusun Oleh : Kelompok
: I SENIN SIANG
1. ADNAN POERBOWALUYOJATI
21030113130161
2. GIKA PUTRI ARIANI
21030113140144
3. OKTOVIA REZKI NURHANAFIAH
21030113120013
LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA II TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS DIPONEGORO SEMARANG 2014
LAPORAN RESMI PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA II HALAMAN JUDUL MATERI PROTEIN
Disusun Oleh : Kelompok
: I SENIN SIANG
1. ADNAN POERBOWALUYOJATI
21030113130161
2. GIKA PUTRI ARIANI
21030113140144
3. OKTOVIA REZKI NURHANAFIAH
21030113120013
LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA II TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS DIPONEGORO SEMARANG 2014
PROTEIN
LEMBAR PENGESAHAN 1.
Judul Praktikum
: Protein
2.
Oleh
:
Kelompok
: 1 / Senin siang
Anggota
: Adnan Poerbowaluyojati
21030113130161
Gika Putri Ariani
21030113140144
Oktovia Rezki Nurhanafiah
21030113120013
Telah disetujui dan disahkan oleh Asisten Pembimbing pada: Hari
:
Tanggal :
Semarang, Juni 2014 Menyetujui, Asisten Laboratorium PDTK II
Hanif Ardhiansyah NIM. 21030111130077
PROTEIN
KATA PENGANTAR Puji syukur atas kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, maka telah selesailah laporan resmi Praktikum Dasar Teknik Kimia II dengan materi Protein. Penulis berharap hasil dari pengerjaan laporan ini tetap maksimal meskipun jangka waktu dalam proses pengerjaannya cukup singkat. Laporan ini diperuntukkan untuk memenuhi tugas akhir mata kuliah Praktikum Dasar Teknik Kimia II. Adapun isi dari laporan ini adalah pembahasan mengenai hasil percobaan dari praktikum Protein. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1. Orang tua yang telah memberikan dukungan baik materil maupun spiritual. 2. Ibu Ir. C. Sri Budiyati, M.T. selaku Penanggung jawab Laboratorium Dasar Teknik Kimia II. 3. Tito Setiawan Nugroho, Hanif Ardhiansyah, dan Indri Wahyuningtyas selaku Asisten pembimbing Protein Laboratorium Dasar Teknik Kimia II. 4. Para Asisten Laboratorium Dasar Teknik Kimia II. 5. Teman-teman keluarga 2013 yang banyak membantu dalam penyusunan laporan ini.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari sempurna, karenanya penulis mengharapkan kritik dan saran yang sifatnya membangun dari semua pihak.
Semarang, Juni 2014
Penyusun
PROTEIN
INTISARI Protein merupakan suatu senyawa organik dengan bobot monomer yang sangat besar, susunannya sangat kuat serta tersusun dari rangkaian asam amino. Ikatan utama asam amino yang satu dan yang lain terjadi karena adanya ikatan polipeptida, sehingga disebut polipeptida. Protein terdiri dari unsur-unsur C, H, N, O, P, dan S. hasil hidrolisis dari protein adalah asam amino. Protein dapat diklasifikasikan menjadi beberapa jenis berdasarkan bentuk molekul, komponen penyusun, asal, dan fungsinya. Salah satu metode yang digunakan untuk analisa protein adalah Metode Kjehdahl. Metode Kjehdahl terdiri dari 3 tahapan, yaitu destruksi, destilasi, dan titrasi. Pada percobaan ini, kami melakukan uji kadar protein dan nitrogen (N), serta uji kadar air dengan sampel jamur merang. Untuk uji protein, yang dilakukan pertama kali adalah menimbang sejumlah sampel. Kemudian mencampurkan dengan 10 gram Na2SO4, 5 gram CuSO4, dan 30 ml H2SO4 pekat dalam labu digester. Kemudian sampel didestruksi selama 2 jam hingga warna larutan menjadi jernih. Kemudian sampel didestilasi dan destilatnya dititrasi dengan menggunakan HCl standar hingga mencapa titik akhir titrasi. Sedangkan untuk uji kadar air, kami mengambil sejumlah sampel kemudian dipanaskan dengan oven selama 1 jam dalam suhu 105°C. Kemudian sampel didinginkan hingga mencapai suhu ruangan dalam desikator dan ditimbang. Dari percobaan yang dilakukan, diketahui bahwa kadar protein dan air dari jamur merang adalah 41,45% dan 91,5%, berbeda dari referensi yang kami punya. Hal ini dapat disebabkan oleh beberapa hal, antara lain waktu kontak asam sulfat dengan sampel, adanya zat-zat lain yang terukur sebagai protein, dan waktu destilasi yang tidak ideal. Selain metode Kjehdahl, terdapat beberapa metode ain yang dapat digunakan untuk mengukur kadar protein, di antaranya adalah metode biuret dan metode Lowry. Sebagai saran diharapkan melakukan destilasi dalam waktu optimum agar hasil yang didapatkan lebih sempurna.
PROTEIN
SUMMARY Protein is an organic substance which have large weight number, compact composition and compiled by the number of amino acid. The main bond of amino acid happened because there are polypeptide bond which arranged each other, so it is called polypeptide. Protein consisted by the number of unsure such as C, H, O, N, S and P. Hydrolysis result of protein is amino acid. Protein can be classified to some of part based on molecule shape, compiling component, source and it’s function. One of method to analysis protein is kjedahl method. This method separated into three part, destruction, distillation and titration. In this experiment, we analysis the content of protein and water content in Tristaniopsis sp. The first step for analysis the content of protein is determine the weight of the sample. Then, we mixed 10 gr of N2SO4, 5 gr of CuSO4 and 30 ml of H2SO4 concentrated in digester flask. After that we do the distillation process and for the distillate, we do titration process using standard KCL until final number of titration. For the analysis of water content, we oven the sample in one hour with the temperature 150oC. Then the sample cooled for while in desicator until reach the room temperature and after that we calculate the weight of the sample. The result of the experiment, we can conclude the content of protein and water content in Tristaniopsis sp is 41,45% and 91,5%. The result show different result based on the last experiment. It can be caused by same of reason, such as contact time between sulfate acid and sample, another substance which can be determine as protein and un ideal destruction time. Besides kjedahl method, there are another way to determine content of protein. They are buret method and lowry method. For the suggestion, we must do the destruction process with optimum time so we can get the perfect result of experiment
PROTEIN
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL...................................................................................................... i LEMBAR PENGESAHAN ......................................................................................... ii KATA PENGANTAR ................................................................................................. iii INTISARI ...................................................................................................................... iv SUMMARY .................................................................................................................... v DAFTAR ISI ................................................................................................................ vi DAFTAR TABEL ...................................................................................................... viii DAFTAR GAMBAR ................................................................................................... ix BAB I (PENDAHULUAN) .......................................................................................... 1 1.1.
Latar Belakang ............................................................................................... 1
1.2.
Tujuan Percobaan ........................................................................................... 1
1.3.
Manfaat Percobaan ......................................................................................... 2
BAB II (TINJAUAN PUSTAKA) ................................................................................ 3 2.1.
Pengertian Protein .......................................................................................... 3
2.2.
Metode Kjeldahl ............................................................................................. 3
2.3.
Hal-hal Yang Perlu Diperhatikan ................................................................... 5
2.4.
Fenomena Titrasi pada Metode Kjehdahl....................................................... 7
2.5.
Katalis pada Metode Kjeldahl ........................................................................ 8
2.6.
Metode Analisa Protein selain Kjeldahl ......................................................... 9
BAB III (METODOLOGI PERCOBAAN) ................................................................ 11 3.1.
Bahan dan Alat ............................................................................................. 11
3.1.1.
Bahan Yang Digunakan ........................................................................ 11
3.1.2.
Alat Yang Digunakan ............................................................................ 11
3.2.
Gambar Alat ................................................................................................. 12
3.3.
Cara Kerja..................................................................................................... 13
3.3.1.
Uji Kadar N & Protein .......................................................................... 13
PROTEIN
3.3.2.
Uji Kadar Air......................................................................................... 14
BAB IV (HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN) ........................................ 15 4.1.
Hasil Percobaan ............................................................................................ 15
4.2.
Pembahasan .................................................................................................. 15
4.2.1.
Kadar Protein Praktikum Lebih Besar daripada Kadar Teoritis ........... 15
BAB V (PENUTUP) ................................................................................................... 17 5.1.
Kesimpulan ................................................................................................... 17
5.2.
Saran ............................................................................................................. 17
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................. 18 LAMPIRAN .............................................................................................................. A-1 DATA HASIL PERCOBAAN .................................................................................. A-1 LEMBAR PERHITUNGAN ..................................................................................... B-1 LEMBAR PERHITUNGAN REAGEN ................................................................... C-1 LEMBAR KUANTITAS REAGEN ......................................................................... D-1 REFERENSI ............................................................................................................. E-1 LEMBAR ASISTENSI ............................................................................................. F-1
PROTEIN
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Faktor Konversi Kandungan N Beberapa Bahan Makanan .................. 4 Tabel 4. I. Hasil Percobaan ................................................................................... 15
PROTEIN
DAFTAR GAMBAR
Gambar 3.1 Rangkaian Alat Destruksi.................................................................. 12 Gambar 3.2 Rangkaian Alat Destilasi ................................................................... 12 Gambar 3.3 Rangkaian Alat Titrasi ...................................................................... 13
PROTEIN
BAB I PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang Protein merupakan suatu zat makanan yang amat penting bagi tubuh., karena zat ini di samping berfungsi sebagai bahan baker dalam tubuh juga berfungsi sebagai zat pembangun dan pengatur. Protein adalah sumber asam-asam amino yang mengandung unsure-unsur C,H,O dan N yang tidak di miliki oleh lemak dan karbohidrat. Molekul protein mengandung pula fosfor, belerang, dan ada jenis protein yang mengandung unsure logam seperti besi dan tembaga (Dwi, 2012). Sebagai zat pembangun protein merupakan bahan pembentuk jaringanjaringan baru yang selalu terjadi dalam tubuh. Pada masa pertumbuhan proses pembentukan jaringan terjadi secara besar-besaran, pada masa kehamilan proteinlah yang membenuk jaringan janin dan pertumbuhan embrio. Protein juga mengganti jaringan tubuh yang rusak dan yang di rombak. Fungsi utama protein bagi tubuh ialah untuk membentuk jaringan baru dan mempertahankan jaringan yang telah ada (Dwi, 2012). Salah satu cara untuk menganalisa adanya protein dalam suatu bahan dapat diketahui dengan menggunakan metode kjedahl. Metode ini merupakan metode yang sederhana untuk penetapan nitrogen total pada asam amino, protein, dan senyawa yang mengandung nitrogen. Sampel didestruksi dengan asam sulfat dan dikatalisis dengan katalisator yang sesuai sehingga akan menghasilkan amonium sulfat. Setelah pembebasan alkali dengan kuat, amonia yang terbentuk disuling uap secara kuantitatif ke dalam larutan penyerap dan ditetapkan secara titrasi (Ardyan dkk, 2010)
1.2. Tujuan Percobaan 1. Mahasiswa mampu merangkai alat analisa protein 2. Mahasiswa mampu mengoperasikan alat analisa protein
PROTEIN
3. Mahasiswa mampu memahami fenomena yang terjadi pada praktikum maupun terampil menganalisa sampel secara kuantitatif. 1.3. Manfaat Percobaan 1. Mahasiswa
mampu
menyusun
rangkaian
alat
analisa
protein
dan
mengoperasikannya, 2. Mahasiswa mampu memahami reaksi-reaksi dasar yang terjadi serta 3. Mahasiswa mampu menentukan kadar protein pada sampel sesuai dengan prosedur yang benar
PROTEIN
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Pengertian Protein Protein merupakan suatu senyawa organik dengan bobot monomer yang sangat besar, susunannya sangat kompleks serta tersusun dari rangkaian asam amino. Ikatan utama asam amino yang satu dengan yang lain terjadi karena adanya ikatan peptida, sehingga protein sering disebut polipeptida. Protein terdiri dari unsur-unsur C, H, O, dan N serta kadang-kadang dijumpai S dan P. Bila protein dihidrolisa dengan menggunakan larutan asam atau bantuan enzim, menghasilkan asam amino. Asam amino merupakan asam organik yang mempunyai gugus karboksil – COO– yang bersifat asam dan gugus –NH3+ yang bersifat basa. Di dalam asam amino, baik gugus asam maupun basa bersifat lemah. Protein dapat diklasifikasikan berdasarkan bentuk molekulnya, komponen penyusunnya, asalnya maupun fungsinya. 1. Berdasarkan bentuk molekul meliputi: Globular, Fibrosa, Membrane. 2. Berdasarkan komponen penyusun meliputi: Albumin, Globulin, Histerin, Protamine, Keratin, Elastin. 3. Berdasarkan sumbernya meliputi: Nabati, Hewani. 4. Berdasarkan fungsi biologis meliputi: Enzim, Hormon, Pembangun, Kontraktil, Pengangkut. Protein mempunyai berbagai kegunaan, diantaranya sebagai berikut: sebagai zat pembangun, pengganti sel-sel yang rusak, zat pengemulsi, zat penghasil energi, pembentukan enzim, buffer untuk mempertahankan pH tubuh, dan penghasil wol dan sutera sintetis pada industry tekstil. 2.2. Metode Kjeldahl Metode ini (AOAC,2000) paling banyak digunakan karena penggunaannya mudah dan kesalahannya tidak terlalu besar. Metode ini tidak dapat digunakan untuk menganalisa banyaknya protein atau asam amino suatu zat, yang dinyatakan sebagai
PROTEIN
nitrogen jika diinginkan mengetahui kadar protein/ asam amino yang terkandung dalam bahannya, maka biasanya kadar nitrogen dikalikan faktor konversi. Faktor ini berbeda pada berbagai zat namun diambil rata-ratanya. Untuk berbagai jenis bahan makanan, faktor konversi N ke protein sebesar 6,25 (jones factor). Umumnya kandungan Nitrogen dalam protein sekitar 16%. Beberapa faktor konversi kandungan N ke bahan pangan (specific jones factor) dapat dilihat pada tabel berikut: Tabel 2.1 Faktor Konversi Kandungan N Beberapa Bahan Makanan (Merril & Watt, 1973) Bahan Pangan
Faktor
1. Telur
6,25
2. Daging
6,25
3. Susu
6,38
4. Gandum
5,83
5. Beras
5,95
6. Kacang Tanah
5,71
7. Kedelai
5,46
Analisa kadar N secara Kjeldahl dibagi tiga tahap, yaitu: 1) Destruksi Sampel didestruksi dengan H2SO4 di dalam labu Kjeldahl dimana di atasnya ditutup dengan gelas arloji untuk menjaga agar tidak banyak uap yang keluar dari labu. Mula-mula cairan dalam labu menjadi hitam yaitu sewaktu zat-zat terurai menghasilkan karbon. Ketika atom-atom sudah membentuk ikatan lagi maka larutan akan menjadi jernih yang berarti destruksi selesai.
(Persamaan Reaksi 2.1)
PROTEIN
(Persamaan Reaksi 2.2)
2) Destilasi Destilasi dilakukan sambil penambahan larutan NaOH sehingga terjadi reaksi : (Persamaan Reaksi 2.3) Amoniak yang terbentuk dialirkan ke larutan asam boraks sehingga terjadi reaksi : (Persamaan Reaksi 2.4) 3) Titrasi Amonium borat yang terjadi dititrasi dengan HCl. (Persamaan Reaksi 2.5) 2.3. Hal-hal Yang Perlu Diperhatikan 1.
Bahan dalam keadaan kering (kering angin atau kering oven) dan halus agar proses destruksi sempurna
2.
Pemanasan harus merata
3.
Pada waktu destilasi, destilat dimasukkan ke dalam boraks jenuh dalam erlenmeyer agar NH3 dapat segera diikat dan tidak menguap keluar. Selain itu dipasang kapas antara adaptor dan leher erlenmeyer untuk mencegah penguapan
4.
Titrasi sangat penting sehingga larutan HCl harus distandarisasi terlebih dahulu untuk mengetahui normalitas HCl yang dipakai
5.
Pada proses destruksi larutan yang didapat harus sampai jernih, sebab apabila belum jernih berarti destruksi belum sempurna. Garam-garam dan katalis yang digunakan pada metode kjeldahl Pada tahapan destruksi sering ditambahkan katalis berupa campuran Na 2SO4
dan HgO (20:1). Gunning menganjurkan menggunakan K2SO4 atau Cu2SO4. Pada percobaan ini kami menggunakan Cu2SO4. Selain katalisator, sering juga diberikan
PROTEIN
selenium. Selenium ini dapat mempercepat proses oksidasi karena zat tersebut selain menaikkan titik didih juga mudah mengaddkan perubahan dari valensi tinggi ke valensi rendah atau sebaliknya. Pada tahapan destilasi, adanya penambahan NaOH untuk memberikan suasana basa karena reaksi tidak dapat berlangsung dalam keadaan asam.selain memberikan suasana basa, sifat NaOH yang apabila ditambah aquadest menghasilkan panas dapat memberikan masukan energi pada proses destilasi. Fenomena saat titrasi pada metode kjeldahl Pada tahap titrasi hasil destilat yang bercampur dengan asam borat di titrasi dengan HCl 0,1 N dimana asam borat menangkap gas ammonia dan membentuk amonium borat. Dengan reaksi : 4 NH3 + 2 H3BO3 - 2 (NH4)2 BO3 + H2 Kemudian ammonium borat ini di titrasi dengan HCl 0,1N. dimana ammonium borat tadi telah ditetesi dengan indicator MO sebagai indicator asam basa. Reaksi yang terjadi : (NH4)3 BO3 + 3HCl – 3NH4Cl + H3BO3 (Persamaan Reaksi 2.6) Penambahan HCl menetralkan kompleks ammonium borat sehingga terjadi perubahan warna. Aplikasi kadar air dalam industri
Penentuan kadar air sangat penting dan paling luas dilakukan dalam pengolahan dan pengujian pangan. Karena jumlah bahan kering (dry matter) dalam pangan adalah kebalikan dari jumlah air yang dikandung, maka kadar air berkaitan secara langsung dengan kepentingan ekonomi baik bagi pengolah (produsen) maupun konsumen.
Penentuan kadar air juga penting dalam masalah industry untuk evaluasi material’s balance atau kehilangan-kehilangan selama pengolahan. Kita harus tahu kandungan air untuk pengolahan optimum, misalnya dalam penggilingan
PROTEIN
serealia, pencampuran adonan sampai konsistensi terentu, dan produksi roti dengan daya awet dan tekstur tinggi.
Kadar air juga dibutuhkan dalam penentuan nilai gizi pangan untuk memenuhi standar komposisi dan peraturan-peraturan pangan. Kepentingan yang lain adalah bahwa kadar air diperlukan untuk penentuan mengetahui pengolahan terhadap komposisi kimia yang sering dinyatakan pada dasar dry matter.
2.4. Fenomena Titrasi pada Metode Kjehdahl Metode kjehdal adalah salah sau metode yang dapat digunakan untuk menentukan kadar nitrogen dan protein dalam suatu bahan dengan cara yang sederhana. Prinsip dari metode ini adalah penentuan jumlah nitrogen yang dikandung dalam suatu bahan engan cara mendegradasi protein bahan organic
dengan
menggunakan asam sulfat pekat untuk menghasilkan nitrogen sebaagai ammonia. Terdapat 3 tahapan pada metode ini, yaitu: 1. Proses destruksi Pada tahapan ini yang terjadi adalah penguraian bahan orgaanik menjadi unsurunsurnya dengan mengggunnakan bantuann larutan H2SO4 pekat dan pemanasan. Proses destruksi dilakukan dalam lemari asam agar unsur S yang dihasilkan tidak menyebar diruang terbuka dalam bentuk SO2, kaena senyawa ini termasuk senyawa yang mmbahayakan. Reaksi yang terjadi adalah: Bahan organic + H2SO4 panas CO2 + SO2 + (NH4)2SO4 + H2O Proses destruksi diakukan hingga larutan yang pada awalproses berwarna hitam berubah menjadi jernih. Setelah proses destruksi selesai , sekitar 4-8 jam, larutan yang tlah didestrusksi didinginkan agar dapat direaksikan pada tahapan berikutnya. 2. Proses destilasi Pada tahapan ini, larutan yang telah didinginkan hingga mencapai suhu ruag, ditambahkan aquadest secukuonya. Setelah itu larutan ditambahkan sedikit bubuk Zn gar dpat mencegah terjadinya percikan api. Setelah itu larutan kembli dipanaskan,
PROTEIN
sembari ditambahkan NaOH secukupnya, hingga NaOH habis bereaksi, dan eluruh ammonia telah tercampur dengan larutan asam boraks. Reaksi yang terjadi adalah: (NH4)2SO4 + 2 NaOH 2NH4OH + Na2SO4 Larutan asam boraks dipilih pada reaksi ini karena dapat menangkap NH3 yang menguap secaara efektif. Pada larutan ini ditambahkan Methyl Orange (MO) sebagai indicator pada tahap reaksi berikutnya. Proses yang tejadi pada saat destilassi adalah: 2NH4OH 2NH3 + 2H2O 4NH3 + 2H3BO3 2(NH4)2BO3 + H2 Setelah seluruh ammonia ditangkap oleh asam boraks maka prosess destilasi dihentikan dan dilanjutkan pada proses titrasi. 3. Tahap Titrasi Titrasi merupakan tahap terakhir dari seluruh metode Kjehdahl pada penentuan kadar protein dalam bahan pangan yang dianalisis. Dengan menggunakan titrasndardiasassti, dapat diketahui banyaknya asam boraks yang breaksi dengan ammonia. Untuk titrasi, destilat dititrasi dengan HCl yang telah distandardisasi sebelumnya. Pada tahapan ini digunakan indicator MO dan titrasi dihentikan bila warna larutan telah berubah menjadi merah muda. Reaksi yang terjadi: (NH4)3BO3 + 3HCl 3NH4Cl + H3BO3 2.5. Katalis pada Metode Kjeldahl Ada bermacam katalis yang dapat digunakan pada metode Kjeldahl. Analisis ini sebagian besar adalah otomatis, katalis berperan untuk mempercepat dekomposisi. Awalnya katalis pilihan adalah oksida merkuri. Oksida merkuri adalah katalis yang sangat efektif, namun masalah kesehatan mengakibatkan oksida merkuri tergantikan dengan tembaga sulfat. Tembaga sulfat tidak seefisien oksida merkuri, dan menghasilkan hasil protein yang lebih rendah. Lalutembaga sulfat tergantikan dengan titanium dioksida, yang saat ini katalis disetujui semua metode analisis protein dalam Metode Resmi dan Praktik Rekomendasi Society American Oil Chemists.
PROTEIN
Metode Kjeldahl merupakan metode yang sederhana untuk analisa protein. Pada tahap destruksi, sampel dipanaskan dalam asam sulfat pekat sehingga terjadi destruksi menjadi unsur-unsurnya.Untuk mempercepat proses destruksi sering ditambahkan katalisator berupa campuran Na2SO4 dan HgO (20:1). Gunning menganjurkan menggunakan K2SO4 atau CuSO4. Dengan penambahan katalisator tersebut titk didih asam sulfat akan dipertinggi sehingga destruksi berjalan lebih cepat. Selain katalisator yang telah disebutkan tadi, kadang-kadang juga diberikan Selenium. Selenium dapat mempercepat proses oksidasi karena zat tersebut selain menaikkan titik didih juga mudah mengadakan perubahan dari valensi tinggi ke valensi rendah atau sebaliknya. (Elfian Permana, 2013) 2.6. Metode Analisa Protein selain Kjeldahl Ada beberapa metode yang dapat di gunakan untuk menganalisa kadar protein selai Metode Kjeldahl, diantaranya adalah: 1. Metode Biuret Metode Biuret merupakan salah satu cara yang terbaik untuk menentukan kadar protein suatu larutan. Dalam larutan basa, Cu2+ akan membentuk kompleks dengan ikatan peptida suatu protein, sehingga menghasilkan warna ungu yang dapat didentifikasi
dengan
spektrofotometer
pada
panjang
gelombang
520nm.
Absorbansinya berbanding dengan konsentrasi proteinnya dan tidak bergantung kepada jenis proteinnya. Hal ini disebabkan protein pada dasarnya mempunyai jumlah ikatan peptida yang sama persatuan berat. (Dian Husada, 2013) 2. Metode Lowry Prinsip Metode Lowry adalah protein dengan asam posfotungsat dan posfomolibdat pada suasana basadapat membentuk warna biru yang intensitasnya tergantung pada konsentrasi protein. Asam amino yang bereaksi adalah tirosin dan triptofan.
PROTEIN
Prosedurnya hampir sama dengan Metode Biuret. Bedanya adalah pada reagennya. Reagen yang digunakan adalah reagen Lowry dan perlu disiapkan protein BSA untuk pembuatan kurva standar. Sensitifitas Metode Lowry lebih tinggi dibanding Metode Biuret. Namun perlu diperhatikan bahwa ada senyawa pengganggu metode ini yaitu senyawa fenol karena adapat membentuk warna biru. Hal ini dapat dihilangkan dengan cara pengendapan menggunakan TCA (Tri Chloro Acetic-acid). (Dr. Ir. Anang M Legowo, MSc & Ir. Nurwantoro, MS. 2004) 3. Metode Pengikatan Zat Warna/Pengecatan (Dye Binding) Prinsip analisis protein ini yaitu zat warna dapat bereaksi dengan gugus polar protein membentuk kompleks tak larut. Kompleks akan dipisahkan dengan sentrifus dan penyaringan dan diukur densitas optiknya. Bahan pewarna yang digunakan adalah orange G, orange 12, dan Amido Black. Dalam analisis ini diperlukan kurva standar hubungan antara densitas optik dengan kadar protein. (Dr. Ir. Anang M Legowo, MSc & Ir. Nurwantoro, MS. 2004)
PROTEIN
BAB III METODE PERCOBAAN 3.1. Bahan dan Alat 3.1.1. Bahan Yang Digunakan 1.
Jamur Merang Putih (5 gr dan 3 gr untuk kadar air)
2.
Serbuk Zn 4 gr
3.
HCl 0,1 N 150 ml
4.
NaOH 5 N 100 ml
5.
H2SO4 Pekat 30 ml
6.
MO Secukupnya
7.
CuSO4.5.H2O 5 gr
8.
Asam boraks jenuh
9.
Na2SO4 anhidrid 10 gr
10. Aquadest 100 ml 3.1.2. Alat Yang Digunakan 1.
Labu digester
2.
Labu destilasi
3.
Labu Kjedahl
4.
Pendingin Liebig
5.
Adaptor
6.
Kompor listrik
7.
Beaker glass
8.
Gelas ukur
9.
Erlenmeyer
10. Pipet tetes 11. Cawan porselen 12. Statif dan klem 13. Corong pemisah
PROTEIN
3.2. Gambar Alat
Gambar 3.1 Rangkaian Alat Destruksi (1.Klem, 2.Statif, 3.Labu Kjedahl dan 4. Kompor Listrik)
Gambar 3.2 Rangkaian Alat Destilasi (1. Klem, 2. Statif, 3. Labu Destilasi, 4. Kompor Listrik, 5.Corong Pemisah, 6. Pendingin Liebig, 7. Adaptor dan 8. Erlenmeyer)
PROTEIN
Gambar 3.3 Rangkaian Alat Titrasi (1. Klem, 2. Statif, 3. Buret dan 4. Erlenmeyer)
3.3. Cara Kerja 3.3.1. Uji Kadar N & Protein 1.
Menimbang 5 gr jamur yang sudah dalam keadaan kering dan halus, lalu masukkan dalam labu digester.
2.
Tambahkan 10 gr Na2SO4 anhidrid, 5gr CuSO4.5.H2O dan 30 ml H2SO4 pekat
3.
Panaskan campuran tersebut pelan-pelan sampai tidak terbentuk percikan lagi, kemudian pemanasan diteruskan dengan cepat sampai destruksi sempurna yaitu larutan menjadi jernih. Biasanya destruksi atau digestion membutuhkan waktu dua jam dan selama prosesnya, labu digester sering diputar-putar agar tidak terjadi pemanasan setempat.
4.
Dinginkan labu dan tambahkan aquadest secukupnya, masukkan dalam labu destilasi. Tambahkan 4 gr serbuk Zn untuk mencegah terjadinya bumping serta percikan.
5.
Pasang peralatan untuk destilasi.
6.
Selama proses destilasi tambahkan 100 ml larutan NaOH 5 N, destilat ditampung dalam erlenmeyer yang berisi asam boraks jenuh sebanyak 150 ml. Lakukan sampai NaOH habis.
7.
Titrasi destilat yang diperoleh dengan menggunakan HCl. Catat kebutuhan titran.
PROTEIN
8.
Hitung kadar protein dalam jamur dengan mengalikan kadar nitrogen yang diperoleh dengan faktor konversi. (
)
3.3.2. Uji Kadar Air 1.
Timbang cawan kering yang akan digunakan dalam keadaan kosong.
2.
Letakkan 3 gram sampel jamur di atas cawan kemudian timbang beratnya.
3.
Masukkan cawan berisi sampel dalam oven dengan suhu 105°C selama 1 jam, pastikan oven telah panas dan siap untuk mengeringkan sampel jamur.
4.
Setelah selesai dikeringkan, masukkan cawan berisi sampel ke dalam desikator, didinginkan sampai suhu konstan dan hingga berat sampel dan cawan tetap. (
) ( (
) ) (
)
PROTEIN
BAB IV HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil Percobaan Tabel 4. I. Hasil Percobaan Kadar Air (%) Teoritis Praktis
91,5
Kadar Protein (%) 14-25 41,45
4.2. Pembahasan 4.2.1. Kadar Protein Praktikum Lebih Besar daripada Kadar Teoritis 1. Waktu kontak asam sulfat dengan sampel Garam Kjehdahl terdiri dari campuran Na2SO4 anhidrat dan CuSO4. Ion logam akan menaikkkan titik didih H2SO4 sedangkan Na2SO4 akan menarik air yang terdapat di dalam sampel. Karena titik didih menjadi tinggi, maka asam sulfat akan membutuhkan waktu yang lama untuk menguap. Oleh karena itu, kotak asam sulfat dengan sampel akan lebih efektif. Asam kuat bersifat oksidator kuat, akan mendestruksi sampel menjadi unsur-unsurnya. Selama proses destruksi terjadi reaksi berikut: Cu2SO4 + H2SO4 2CuSO4 + 2H2O + SO2 Protein (CHON) + On + H2SO4 CO2 + H2O + (NH4)2SO4 (Anonim, 2014) Pada percobaan, kami menggunakan katalis Cu2SO4 yang berfungsi untuk mempercepat laju reaksi dan menaikkan titik didih dari H2SO4 sehingga proses destruksi bejalan lebih cepat. Selain Cu2SO4, senyawa lain yang dapat digunakan sebagai katalis adalah campuran Na2SO4 dan HgO, serta K2SO4. (Elfian Permana, 2013)
PROTEIN
2. Zat-zat lain yang terukur sebagai protein Prinsip analisa Kjehdahl adalah sebagai berikut: mula-mula sampel didestruksi dengan asam sulfat pekat. Kemudian setelah proses destruksi selesai, sampel didinginkan dan ditambahkan 4 gr serbuk Zn. Berdasarkan hasil penelitian BannerPerovika (2001), mengenai fraksi protein pada jamur, diketahui bahwa masih terdapat zat-zat lain yang terukur sebagai protein. Zat-zat tersebut antara lain albumina, globulin, gliserin-like, maseral, gluetelin, proalmin, dan prodimin-like mineral, yang secara berurutan kadarnya dapat dinyatakan sebagai berikut: 24,8%; 11,5%; 7,4%; 11,5%; 5,7%; dan 5;3%. Sehingga, kadar yang didapatkan berbeda. (Riri, 2012) (Anonim, 2012) 3. Waktu destruksi yang tidak ideal Menurut Chrisna, G.P. (1994), destruksi secara umum dilakukan pada suhu 400°C- 500°C selama 4-8 jam untuk mendestruksi sampel. Sedangkan, waktu destruksi yang kami gunakan hanya berlangsung selama 2 jam. Waktu destruksi yang tidak ideal ini dapat menyebabkan tidak semua bahan-bahan terdestruksi dengan sempurna. Akibatnya, tidak semua gugus NH3+ dapat dipisahkan dari senyawa asam amino, dan proses pengukuran berikutnya menjadi tidak akurat. (Anonim, 2012)
PROTEIN
BAB V PENUTUP 5.1. Kesimpulan 1. Kadar protein pada jamur merang meurut percobaan adalah 41,45%. 2. Kadar air pada jamur merang menurut percobaan adalah 91,5%. 3. Metode Kjehdahl adalah metode yang paling sering digunakan pada uji analisa kadar protein. 4. Metode analisa kadar protein lainnya selain metode Kjehdahl adalah metode biuret, metode Lowry, dan metode pengikatan zat warna. 5.2. Saran 1. Melakukan destruksi protein lebih lama agar bahan organic terurai sempurna. 2. Melakukan penimbangan sampeldengan cepat untuk uji kadar air agar sampel terjaga dari penambahan kandungan air. 3. Mencuci alat dengan bersih sebelum praktikum dmulai. 4. Melakukan kerja tim dengan baik.
PROTEIN
DAFTAR PUSTAKA
Anonym.
2012.
Analisa
Kadar
Protein
Metode
Kjehdahl.
Dalam
http://digilib.its.ac.id/its undergraduate 33000308250110632. Surabaya: Institut Teknologi Sepuluh November AOAC, 2000, (Association of Official Agricultural Chemist): Official Methods of Analysis 17th ed. Gaithersburg, Maryland, USA. Baldwin J., “Experimental Organic Chemistry”, 2nd ed., Kagakusha Company, Ltd., Tokyo. Dr. Ir. Anang M. Legowo. 2014. Diktat Kuliah Analisis Pangan. Universitas Diponegoro. Semarang. Fessenden & Fessenden, 1986, “Organic Chemistry”. Griffin, R.W., 1969, “Modern Organic Chemistry”, Mc Graw-Hill, Kogakusha, Ltd., Tokyo Krisna, Dwi. 2012. Laporan Analisa Protein. Semarang: Universitas Diponegoro. Merril, A.L and Watt BK, 1973, Energy value of food: basis and deriration, Agriculture Handbook, Washington. Permana, Elfian. 2013. Mengukur Protein dengan Metode Kjehdahl. Dalam http:// elfianpermanaolo.wordpress.com/2013/04/2004/mengukur-protein-metodekjehdahl. Riri. 2012. Faktor Konversi Jamur Merang. Bogor: Institut Pertanian Bogor Sukma, Ardiyan. 2010. Makalah Kimia Analisa Bahan Makanan Metode Kjehdahl. Malang: Universitas Brawijaya Vogel, A.I., 1975, “Qualitative Organics Analysis”, 2nd ed. William Clowers & Sons Limited London.
PROTEIN
LAMPIRAN
DATA HASIL PERCOBAAN LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA II JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS DIPONEGORO
MATERI I.
: Protein
VARIABEL Waktu destruksi 2 jam
II.
BAHAN DAN ALAT Bahan:
1.
Jamur Merang Putih (5 gr dan 3 gr untuk kadar air)
2.
Serbuk Zn 4 gr
3.
HCl 0,1 N 150 ml
4.
NaOH 5 N 100 ml
5.
H2SO4 Pekat 30 ml
6.
MO Secukupnya
7.
CuSO4.5.H2O 5 gr
8.
Asam boraks jenuh
9.
Na2SO4 anhidrid 10 gr
10. Aquadest 100 ml Alat: 1.
Labu digester
2.
Labu destilasi
3.
Labu Kjedahl
4.
Pendingin Liebig
5.
Adaptor
PROTEIN
6.
Kompor listrik
7.
Beaker glass
8.
Gelas ukur
9.
Erlenmeyer
10. Pipet tetes 11. Cawan porselen 12. Statif dan klem 13. Corong pemisah III.
CARA KERJA
Uji Kadar N & Protein 1.
Menimbang 5 gr jamur yang sudah dalam keadaan kering dan halus, lalu masukkan dalam labu digester.
2.
Tambahkan 10 gr Na2SO4 anhidrid, 5gr CuSO4.5.H2O dan 30 ml H2SO4 pekat
3.
Panaskan campuran tersebut pelan-pelan sampai tidak terbentuk percikan lagi, kemudian pemanasan diteruskan dengan cepat sampai destruksi sempurna yaitu larutan menjadi jernih. Biasanya destruksi atau digestion membutuhkan waktu dua jam dan selama prosesnya, labu digester sering diputar-putar agar tidak terjadi pemanasan setempat.
4.
Dinginkan labu dan tambahkan aquadest secukupnya, masukkan dalam labu destilasi. Tambahkan 4 gr serbuk Zn untuk mencegah terjadinya bumping serta percikan.
5.
Pasang peralatan untuk destilasi.
6.
Selama proses destilasi tambahkan 100 ml larutan NaOH 5 N, destilat ditampung dalam erlenmeyer yang berisi asam boraks jenuh sebanyak 150 ml. Lakukan sampai NaOH habis.
7.
Titrasi destilat yang diperoleh dengan menggunakan HCl. Catat kebutuhan titran.
PROTEIN
8.
Hitung kadar protein dalam jamur dengan mengalikan kadar nitrogen yang diperoleh dengan faktor konversi. (
)
Uji Kadar Air 1.
Timbang cawan kering yang akan digunakan dalam keadaan kosong.
2.
Letakkan 3 gram sampel jamur di atas cawan kemudian timbang beratnya.
3.
Masukkan cawan berisi sampel dalam oven dengan suhu 105°C selama 1 jam, pastikan oven telah panas dan siap untuk mengeringkan sampel jamur.
4.
Setelah selesai dikeringkan, masukkan cawan berisi sampel ke dalam desikator, didinginkan sampai suhu konstan dan hingga berat sampel dan cawan tetap. (
) ( (
IV.
1.
HASIL PERCOBAAN
Uji kadar N dan protein
Titrasi
Volume (ml)
1
2,5
2
2
3
1
V rata-rata
1,82
V destilat
= 157 ml (
)
(
) ) (
)
)
PROTEIN
2.
Uji kadar air
Berat cawan
= 33,387 gram
Berat sampel basah + cawan
= 36,387 gram
Berat sampel kering + cawan
=
1. 33,632 gram 2. 33,638 gram 3. 33,639 gram 4. 33,640 gram 5. 33,642 gram 6. 33,642 gram 7. 33,642 gram (
) ( (
) )
PROTEIN
LEMBAR PERHITUNGAN
1.
Uji kadar N dan Protein (
1.
)
2.
(
)
3.
2.
Uji kadar air 1. 2. 3.
(
) ( (
) )
PROTEIN
LEMBAR PERHITUNGAN REAGEN
Kelompok
: 1 Senin Siang
Nama
: 1. Adnan Poerbowaluyojati 2. Gika Putri Ariani 3. Oktovia Rezki Nurhanafiah
Asisten
: Hanif Ardhiansyah
NaOH 5 N, 100 ml
⁄
PROTEIN
LEMBAR KUANTITAS REAGEN LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA II JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS DIPONEGORO
PRAKTIKUM KE
:5
MATERI
: PROTEIN
HARI, TANGGAL
: SENIN, 12 MEI 2014
KELOMPOK
: 1 SENIN SIANG
NAMA
: 1. ADNAN POERBOWALUYOJATI 2. GIKA PUTRI ARIANI 3. OKTOVIA REZKI NURHANAFIAH
ASISTEN
: HANIF ARDHIANSYAH
KUANTITAS REAGEN NO. JENIS REAGEN 1. Na2SO4 anhidris
10 gr
2.
CuSO4.5H2O
5 gr
3.
H2SO4 pekat
30 ml
4.
Zn pulver
4 gr
5.
NaOH 5N
100 ml
6.
Boraks Jenuh
150 ml
7.
HCl 0,1 N
Secukupnya
8.
MO
Secukupnya
9.
Aquades
100 ml
10.
Sampel jamur -
5 gram protein
-
3 gram air
KUANTITAS
PROTEIN
TUGAS TAMBAHAN 1. Cari factor konversi jamur 2. Hitung kebutuhan NaOH 3. Fungsi masing-masing reagen
CATATAN:
SEMARANG, 6 MEI 2014
Destruksi 2 jam
ASISTEN,
Titrasi 3x @10 ml
HANIF ARDHIANSYAH NIM. 21030111130077
PROTEIN
REFERENSI
Metoda Mikrokjeldahl Prinsipnya adalah penentuan jumlah Nitrogen (N) yang dikandung oleh suatu bahan dengan cara mendegradasi protein bahan organik dengan menggunakan asam sulfat pekat untuk menghasilkan nitrogen sebagai amonia, kemudian menghitung jumlah nitrogen yang terlepas sebagai amonia lalu mengkonversikan ke dalam kadar protein dengan mengalikannya dengan konstanta tertentu. Disebut sebagai metode mikro (Mikrokjeldahl) karena ukuran sampel kecil, yaitu kurang dari 300 mg. Jika sampel yang digunakan lebih dari 300 mg disebut metode makro. Metode mikro digunakan pada bahan yang diduga hanya mengandung sedikit N. Analisa protein dengan metode Mikrokjeldahl pada dasarnya dapat dibagi menjadi tiga tahapan, yaitu proses destruksi, proses destilasi, dan tahap titrasi. 1. Proses destruksi Pada tahap ini, sampel dipanaskan dalam asam sulfat pekat sehingga terjadi penguraian sampel menjadi unsur-unsurnya yaitu unsur-unsur C, H, O, N, S, dan P. Unsur N dalam protein ini dipakai untuk menentukan kandungan protein dalam suatu bahan. 100 mg sampel yaitu kedelai, tepung terigu, dan kedelai ditambah dengan katalisator N 0,5-1 gram dibungkus dengan kertas saring untuk memudahkan dalam memasukkan ke dalam tabung reaksi besar, karena jika tidak sampel dan katalisator akan tercecer. Selain itu kertas saring juga berfungsi untuk menyaring filtrat dengan residu. Katalisator berfungsi untuk mempercepat proses destruksi dengan menaikkan titik didih asam sulfat saat dilakukan penambahan H2SO4 pekat serta mempercepat kenaikan suhu asam sulfat, sehingga destruksi berjalan lebih cepat. Katalisator N terdiri dari campuran K2SO4dan HgO dengan perbandingan 20 : 1. Tiap 1 gram K2SO4 dapat menaikan titih didih 3 0C (Sudarmadji dkk., 1996). Karena titik didih tinggi maka asam sulfat akan membutuhkan waktu yang lama untuk menguap. Karena hal ini kontak asam sulfat dengan sampel akan lebih lama sehingga proses
PROTEIN
destruksi akan berjalan lebih efektif. Selain itu juga dibuat blanko dalam tabung reaksi besar yang berisi katalisator N dan 3 ml H2SO4 agar analisa lebih tepat. Blanko ini berfungsi sebagai faktor koreksi dari adanya senyawa N yang berasal dari reagensia yang digunakan. Setelah ditambah katalisator N, sampel dimasukkan dalam tabung reaksi besar kemudian ditambah dengan 3 ml H2SO4 pekat. H2SO4 pekat yang dipergunakan untuk destruksi diperhitungkan dari adanya bahan protein. Asam sulfat yang bersifat oksidator kuat akan mendestruksi sampel menjadi unsur-unsurnya. Untuk mendestruksi 1 gram protein diperlukan 9 gram asam sulfat. Penambahan asam sulfat dilakukan dalam ruang asam untuk menghindari S yang berada di dalam protein terurai menjadi SO2 yang sangat berbahaya. Setelah penambahan asam sulfat larutan menjadi keruh. Tabung reaksi besar yang berisi sampel kemudian ditempatkan dalam alat destruksi (destruktor) dan ditutup. Setelah siap alat di-ON-kan dan akan terjadi pemanasan yang mengakibatkan reaksi berjalan lebih cepat. Sampel didestruksi hingga larutan berwarna jernih yang mengindikasikan bahwa proses destruksi telah selesai. Selama destruksi, akan terjadi reaksi sebagai berikut : HgO + H2SO4 HgSO4 + H2O 2 HgSO4 Hg2SO4 + SO2 + 2 On Hg2SO4 + 2 H2SO4 2 HgSO4 + 2 H2O + SO2 (CHON) + On + H2SO4 CO2 + H2O + (NH4)2SO4 (Sudarmadji, 1996) Alat destruksi bekerja berdasar prinsip lemari asam. Selama proses destruksi akan dihasilkan gas SO2 yang berbau menyengat dan dapat membahayakan jika dihirup dalam jumlah relatif banyak. Gas yang dihasilkan ini akan bergerak ke atas (tersedot penutup) dan akan disalurkan ke alat penetral. Alat ini terdiri dari dua larutan yaitu NaOH dan aquadest. Awalnya gas SO2 akan masuk dalam tabung yang berisi NaOH. Dalam tabung ini terjadi penetralan gas SO2 oleh larutan NaOH. Kemudian gas hasil penetralan tahap pertama masuk dalam tabung kedua yang berisi
PROTEIN
aquadest. Dalam tabung ini kembali terjadi penetralan sehingga diharapkan semua gas SO2 telah ternetralkan. Selain dibebaskan gas SO2 juga dibebaskan gas CO2 dan H2O sesuai dengan reaksi sebagai berikut : panas Bahan organik + H2SO4 CO2 + SO2 + (NH4)2SO4 + H2O Proses destruksi dapat dikatakan selesai apabila larutan berwarna jernih. Larutan yang jernih menunjukkan bahwa semua partikel padat bahan telah terdestruksi menjadi bentuk partikel yang larut tanpa ada partikel padat yang tersisa. Larutan jernih yang telah mengandung senyawa (NH4)2SO4 ini kemudian didinginkan supaya suhu sampel sama dengan suhu luar sehingga penambahan perlakuan lain pada proses berikutnya dapat memperoleh hasil yang diinginkan karena reaksi yang sebelumnya sudah usai. 2. Proses destilasi Larutan sampel jernih yang telah dingin kemudian ditambah dengan aquadest untuk melarutkan sampel hasil destruksi dan blankonya agar hasil destruksi dapat didestilasi dengan sempurna serta untuk lebih memudahkan proses analisa karena hasil destruksi melekat pada tabung reaksi besar. Kemudian larutan sampel dan blanko didestilasi dalam Kjeltec. Pada dasarnya tujuan destilasi adalah memisahkan zat yang diinginkan, yaitu dengan memecah amonium sulfat menjadi amonia (NH3) dengan menambah 20 ml NaOH-Na2S2O3 kemudian dipanaskan. Prinsip destilasi adalah memisahkan cairan atau larutan berdasarkan perbedaan titik didih. Fungsi penambahan NaOH adalah untuk memberikan suasana basa karena reaksi tidak dapat berlangsung dalam keadaan asam. Sedangkan fungsi penambahan Na2S2O3 adalah untuk mencegah terjadinya ion kompleks antar ammonium sulfat dengan Hg dari katalisator (HgO) yang membentuk merkuri ammonia sehingga membentuk ammonium sulfat. Kompleks yang terjadi ikatannya kuat dan sukar diuapkan. HgO merupakan senyawa yang sukar dipecah dan bersifat mudah meledak. Na2S2O3 berfungsi untuk mengendapkan HgO sehingga tidak mengganggu reaksi kimia selanjutnya.
PROTEIN
Hg + aquadest + SO4 HgSO4 + aquadest Pada tahap destilasi, ammonium sulfat dipecah menjadi ammonia (NH3) dengan penambahan NaOH sampai alkalis dan dipanaskan oleh pemanas dalam alat Kjeltec. Selain itu sifat NaOH yang apabila ditambah dengan aquadest menghasilkan panas, meski energinya tidak terlalu besar jika dibandingkan pemanasan dari alat Kjeltec, ikut memberikan masukan energi pada proses destilasi. Panas tinggi yang dihasilkan alat Kjeltec juga berasal dari reaksi antara NaOH dengan (NH4)2SO4 yang merupakan reaksi yang sangat eksoterm sehingga energinya sangat tinggi. Ammonia yang dibebaskan selanjutnya akan ditangkap oleh larutan asam standar. Asam standar yang dipakai dalam percobaan ini adalah asam borat. Asam standar yang dapat dipakai adalah asam borat 4 % dalam jumlah yang berlebihan. Larutan sampel yang telah terdestruksi dimasukkan dalam Kjeltec dan ditempatkan di sebelah kiri. Kemudian alat destilasi berupa pipa kecil panjang dimasukkan ke dalamnya hingga hampir mencapai dasar tabung reaksi sehingga diharapkan proses destilasi akan berjalan maksimal (sempurna). Erlenmeyer yang berisi 5 ml asam borat 4 % + BCG-MR (campuran brom cresol green dan methyl red) ditempatkan di bagian kanan Kjeltec. BCG-MR merupakan indikator yang bersifat amfoter, yaitu bisa bereaksi dengan asam maupun basa. Indikator ini digunakan untuk mengetahui asam dalam keadaan berlebih. Selain itu alasan pemilihan indikator ini adalah karena memiliki trayek pH 6-8 (melalui suasana asam dan basa / dapat bekerja pada suasana asam dan basa) yang berarti trayek kerjanya luas (meliputi asam-netralbasa). Pada suasana asam indikator akan berwarna merah muda, sedang pada suasana basa akan berwarna biru. Setelah ditambah BCG-MR, larutan akan berwarna merah muda karena berada dalam kondisi asam. Asam borat (H3BO3) berfungsi sebagai penangkap NH3 sebagai destilat berupa gas yang bersifat basa. Supaya ammonia dapat ditangkap secara maksimal, maka sebaiknya ujung alat destilasi ini tercelup semua ke dalam larutan asam standar sehingga dapat ditentukan jumlah protein sesuai dengan kadar protein bahan. Selama proses destilasi lama-kelamaan larutan asam borat akan berubah membiru karena
PROTEIN
larutan menangkap adanya ammonia dalam bahan yang bersifat basa sehingga mengubah warna merah muda menjadi biru. Reaksi yang terjadi : (NH4)SO4 + NaOH Na2SO4 + 2 NH4OH 2NH4OH 2NH3 + 2H2O 4NH3 + 2H3BO3 2(NH4)2BO3 +H2 Reaksi destilasi akan berakhir bila ammonia yang telah terdestilasi tidak bereaksi basis. Setelah destilasi selesai larutan sampel berwarna keruh dan terdapat endapan di dasar tabung (endapan HgO) dan larutan asam dalam erlenmeyer berwarna biru karena dalam suasana basa akibat menangkap ammonia. Ammonia yang terbentuk selama destilasi dapat ditangkap sebagai destilat setelah diembunkan (kondensasi) oleh pendingin balik di bagian belakang alat Kjeltec dan dialirkan ke dalam erlenmeyer. 3. Tahap titrasi Titrasi merupakan tahap akhir dari seluruh metode Kjeldahl pada penentuan kadar protein dalam bahan pangan yang dianalisis. Dengan melakukan titrasi, dapat diketahui banyaknya asam borat yang bereaksi dengan ammonia. Untuk tahap titrasi, destilat dititrasi dengan HCl yang telah distandarisasi (telah disiapkan) sebelumnya. Normalitas yang diperoleh dari hasil standarisasi adalah 0,02 N. Selain destilat sampel, destilat blanko juga dititrasi karena selisih titrasi sampel dengan titrasi blanko merupakan ekuivalen jumlah nitrogen. Jadi, banyaknya HCl yang diperlukan untuk menetralkan ekuivalen dengan banyaknya N. Titrasi HCl dilakukan sampai titik ekuivalen yang ditandai dengan berubahnya warna larutan biru menjadi merah muda karena adanya HCl berlebih yang menyebabkan suasana asam (indikator BCG-MR berwarna merah muda pada suasana asam). Melalui titrasi ini, dapat diketahui kandungan N dalam bentuk NH4 sehingga kandungan N dalam protein pada sampel dapat diketahui: Kadar nitrogen (% N) dapat ditentukan dengan rumus : % N = (ts – tb) x N HCl x 14,008 x 100 %
PROTEIN
mg sampel dengan ts : volume titrasi sampel tb : volume titrasi blanko % protein (wb) = % N x fk dengan fk : faktor konversi / perkalian = 6,25 Dasar perhitungan penentuan protein menurut metode ini adalah hasil penelitian dan pengamatan yang menyatakan bahwa umumnya protein alamiah mengandung unsur N rata-rata 16 % (dalam protein murni). Karena pada bahan belum diketahui komposisi unsur-unsur penyusunnya secara pasti maka faktor konversi yang digunakan adalah 100/16 atau 6,25. Apabila pada bahan telah diketahui komposisinya dengan lebih tepat maka faktor konversi yang digunakan adalah faktor konversi yang lebih tepat (telah diketahui per bahan) (Sudarmadji dkk., 1996).
http://www.x3-prima.com/2009/08/protein.html
KJELDAHL Metode Kjeldahl merupakan metode yang sederhana untuk penetapan nitrogen total pada asam amino, protein dan senyawa yang mengandung nitrogen. Sampel didestruksi dengan asam sulfat dan dikatalisis dengan katalisator yang sesuai sehingga akan menghasilkan amonium sulfat. Setelah pembebasan dengan alkali kuat, amonia yang terbentuk disuling uap secara kuantitatif ke dalam larutan penyerap dan ditetapkan secara titrasi. Metode ini telah banyak mengalami modifikasi. Metode ini cocok digunakan secara semimikro, sebab hanya memerlukan jumlah sampel dan pereaksi yang sedikit dan waktu analisa yang pendek. Cara Kjeldahl digunakan untuk menganalisis kadar protein kasar dalam bahan makanan secara tidak langsung, karena yang dianalisis dengan cara ini adalah kadar nitrogennya. Dengan mengalikan hasil analisis tersebut dengan angka konversi 6,25, diperoleh nilai protein dalam bahan makanan itu. Untuk beras, kedelai, dan gandum
PROTEIN
angka konversi berturut-turut sebagai berikut: 5,95, 5,71, dan 5,83. Angka 6,25 berasal dari angka konversi serum albumin yang biasanya mengandung 16% nitrogen. Prinsip cara analisis Kjeldahl adalah sebagai berikut: mula-mula bahan didestruksi dengan asam sulfat pekat menggunakan katalis selenium oksiklorida atau butiran Zn. Amonia yang terjadi ditampung dan dititrasi dengan bantuan indikator. Cara Kjeldahl pada umumnya dapat dibedakan atas dua cara, yaitu cara makro dan semimakro. Cara makro Kjeldahl digunakan untuk contoh yang sukar dihomogenisasi dan besar contoh 1-3 g, sedang semimikro Kjeldahl dirancang untuk contoh ukuran kecil yaitu kurang dari 300 mg dari bahan yang homogen. Cara analisis tersebut akan berhasil baik dengan asumsi nitrogen dalam bentuk ikatan N-N dan N-O dalam sampel tidak terdapat dalam jumlah yang besar. Kekurangan cara analisis ini ialah bahwa purina, pirimidina, vitamin-vitamin, asam amino besar, kreatina, dan kreatinina ikut teranalisis dan terukur sebagai nitrogen protein. Walaupun demikian, cara ini kini masih digunakan dan dianggap cukup teliti untuk pengukuran kadar protein dalam bahan makanan. Analisa protein cara Kjeldahl pada dasarnya dapat dibagi menjadi tiga tahapan yaitu proses destruksi, proses destilasi dan tahap titrasi. 1. Tahap destruksi Pada tahapan ini sampel dipanaskan dalam asam sulfat pekat sehingga terjadi destruksi menjadi unsur-unsurnya. Elemen karbon, hidrogen teroksidasi menjadi CO, CO2 dan H2O. Sedangkan nitrogennya (N) akan berubah menjadi (NH4)2SO4. Untuk mempercepat proses destruksi sering ditambahkan katalisator berupa campuran
Na2SO4dan
HgO
(20:1).
Gunning
menganjurkan
menggunakan
K2SO4 atau CuSO4. Dengan penambahan katalisator tersebut titk didih asam sulfat akan dipertinggi sehingga destruksi berjalan lebih cepat. Selain katalisator yang telah disebutkan tadi, kadang-kadang juga diberikan Selenium. Selenium dapat mempercepat proses oksidasi karena zat tersebut selain menaikkan titik didih juga mudah mengadakan perubahan dari valensi tinggi ke valensi rendah atau sebaliknya. 2. Tahap destilasi
PROTEIN
Pada tahap destilasi, ammonium sulfat dipecah menjadi ammonia (NH3) dengan penambahan NaOH sampai alkalis dan dipanaskan. Agar supaya selama destilasi tidak terjadi superheating ataupun pemercikan cairan atau timbulnya gelembung gas yang besar maka dapat ditambahkan logam zink (Zn). Ammonia yang dibebaskan selanjutnya akan ditangkap oleh asam khlorida atau asam borat 4 % dalam jumlah yang berlebihan. Agar supaya kontak antara asam dan ammonia lebih baik maka diusahakan ujung tabung destilasi tercelup sedalam mungkin dalam asam. Untuk mengetahui asam dalam keadaan berlebihan maka diberi indikator misalnya BCG + MR atau PP. 3. Tahap titrasi Apabila penampung destilat digunakan asam khlorida maka sisa asam khorida yang bereaksi dengan ammonia dititrasi dengan NaOH standar (0,1 N). Akhir titrasi ditandai dengan tepat perubahan warna larutan menjadi merah muda dan tidak hilang selama 30 detik bila menggunakan indikator PP. %N = × N. NaOH × 14,008 × 100% Apabila penampung destilasi digunakan asam borat maka banyaknya asam borat yang bereaksi dengan ammonia dapat diketahui dengan titrasi menggunakan asam khlorida 0,1 N dengan indikator (BCG + MR). Akhir titrasi ditandai dengan perubahan warna larutan dari biru menjadi merah muda. %N = × N.HCl × 14,008 × 100 % Setelah diperoleh %N, selanjutnya dihitung kadar proteinnya dengan mengalikan suatu faktor. Besarnya faktor perkalian N menjadi protein ini tergantung pada persentase N yang menyusun protein dalam suatu bahan
http://kisahfathe.blogspot.com/2009/02/kjeldahl.html.
PROTEIN
Penelitian tentang zat besi sebagai mikronutrien yang penting bagi manusia telah banyak dilakukan. Metode penelitian yang sangat penting digunakan untuk analisa kuantitatif besi adalah Spektrofotometri Serapan Atom (SSA). Metode ini cukup peka untuk analisis logam besi dalam jumlah renik, pelaksanaannya relatif praktis, cepat dan dapat digunakan untuk berbagai mac am bentuk cuplikan, baik itu cuplikan cair maupun material biologis. Kelebihan lain SSA adalah spesifik untuk analisis besi dalam campuran dengan unsur logam lain tanpa diperlukan pemisahan pendahuluan. Preparasi cuplikan sangat menentukan keberhasilan analisis SSA. Preparasi cuplikan dapat dilakukan dengan destruksi kering dan destruksi basah. Pada destruksi kering suhu pengabuan harus diperhatikan karena banyak elemen abu yang dapat menguap pada suhu tinggi, selain itu suhu pengabuan juga dapat menyebabkan dekomposisi senyawa tertentu. Oleh karena itu suhu pengabuan untuk setiap bahan berbeda-beda bergantung komponen yang ada dalam bahan tersebut (Anderson, Richard, 1991). Menurut Christian, G.D (1994), destruksi kering secara umum dilakukan pada suhu antara 400-550 ° C selama 4 sampai 8 jam untuk mendestruksi senyawa organik dan bahan lain yang ada dalam cuplikan sehingga kadar logam yang akan dianalisis dapat ditetapkan dengan cara SSA setelah cuplikan dilarutkan dengan asam kuat. Menurut ASTM (1994) dan Elmer (1982) penentuan Fe dilakukan dengan pengabuan pada suhu 500°C. Menurut Lee, K (1980) pengabuan dilakukan pada suhu 525°C selama 12-24 jam untuk penentuan Fe. Menurut Sumardi (1987), ada juga 2 destruksi kering yang dilakukan pada suhu maksimum mencapai 750°C atau bahkan 980°C untuk mempercepat proses destruksi pada penentuan Fe. Penentuan Fe dalam produk susu bubuk dengan SSA yang dilakukan oleh Palupi (2001) dengan destruksi kering pada suhu 500°C selama 6 jam memiliki kepresisian cukup tinggi dengan koefisien variasi 1,0736% untuk konsentrasi besi yang cukup rendah. Kelebihan dari destruksi kering adalah lebih sederhana, tidak adanya kesalahan relatif akibat kontaminasi karena hanya sedikit reagen yang digunakan, dan bisa digunakan untuk banyak cuplikan dalam waktu yang bersamaan. Kekurangan destruksi kering adalah
PROTEIN
hilangnya unsur-unsur karena retensi terhadap dinding wadah dan penguapan, serta kontaminasi cuplikan dari logam bahan wadah yang terkadang bersifat sebagai penyerap.
http://digilib.its.ac.id/public/ITS-Undergraduate-10632-1498100055Chapter1.pdf
Natrium Natrium atau sodium adalah unsur kimia dalam tabel periodik yang memiliki simbol Na dan nomor atom 11. Natrium adalah logam reaktif yang lunak, keperakan, dan seperti lilin, yang termasuk ke logam alkali yang banyak terdapat dalam senyawa alam (terutama halite). Dia sangat reaktif, apinya berwarna kuning, beroksidasi dalam udara, dan bereaksi kuat dengan air, sehingga harus disimpan dalam minyak. Karena sangat reaktif, natrium hampir tidak pernah ditemukan dalam bentuk unsur murni Seperti logam alkali lainnya, natrium adalah unsur reaktif yang lunak, ringan, dan putih keperakan, yang tak pernah berwujud sebagai unsur murni di alam. Natrium mengapung di air, menguraikannya menjadi gas hidrogen dan ion hidroksida. Jika digerus menjadi bubuk, natrium akan meledak dalam air secara spontan. Namun, biasanya ia tidak meledak di udarabersuhu di bawah 388 K. Natrium juga bila dalam keadaan berikatan dengan ion OH- maka akan membentuk basa kuat yaitu NaOH.
http://id.wikipedia.org/wiki/Natrium
Bagaimana mekanisme kerja zinc? Penelitian masih berjalan. Menurut kami, kemampuan zinc mencegah diare dihubungkan dengan kemampuannya me-ningkatkan sistim kekebalan tubuh. Zinc merupakan mineral penting bagi tubuh.Lebih 300 enzim dalam tubuh yang bergantung pada zinc. Zinc juga dibutuhkan oleh berbagai organ tubuh, seperti kulit dan mukosa saluran cerna. Semua yang berpe-ran dalam fungsi imun, membutuhkan zinc.
PROTEIN
Jika zinc diberikan pada anak yang sistim kekebalannya belum berkembangbaik, dapat
meningkatkan
sistim
kekebalandan
melindungi
anak
dari
penyakit
infeksi.Itulah, mengapa anak yang diberi zinc lebih kecil kemungkinannya mengalami penyakit infeksi, diare dan pneumonia.Ada penelitian menarik di Amerika Seri-kat, melibatkan orang usia lanjut (60-80tahun). Setelah 7 tahun, mereka menghen-tikan penelitian karena kelompok yangmendapatkan zinc memiliki angka mor-talitas keseluruhan 27% lebih sedikit dibanding kelompok yang tidak mendapatkan zinc. Pada penyakit kanker dan kar-diovaskuler tidak berubah, tetapi terdapatpenurunan
signifikan
atau
hampir
tidak ada
angka
kejadian
penyakit infeksi.Mekanisme lainnya adalah efek zincpada cAMP pada tingkat enterocyte, me-nyebabkan peningkatan absorpsi Na+ danmenurunkan sekresi Cl-. Kita tahu, zincadalah kofaktor enzim utama yang mensti-mulasi pembelahan sel. Jadi, ketika zinc diberikan, terjadi peningkatan pembelahansel. Ketika zinc diberikan pada penderirta diare, terjadi perbaikan mukosa. Mukosa menjadi lebih kuat melawan diare. Kese-mua mekanisme ini bekerja secara bersa-maan, sehingga zinc memiliki efek pengo-batan dan pencegahan.
http://www.scribd.com/doc/15338605/POUZN-Zinc-at-Konika-IDAIIndonesia-Ethical-Digest-808
Dalam prakteknya, analisis ini sebagian besar otomatis; katalis spesifik mempercepat dekomposisi. Awalnya, katalis pilihan adalah oksida merkuri. Namun, sementara itu sangat efektif, masalah kesehatan mengakibatkan itu digantikan oleh tembaga sulfat. Tembaga sulfat tidak seefisien oksida merkuri, dan menghasilkan hasil protein yang lebih rendah. Itu segera dilengkapi dengan titanium dioksida, yang saat ini katalis disetujui semua metode analisis protein dalam Metode Resmi dan Praktik Rekomendasi Society American Oil Chemists '.Kjeldahl digestion Kjeldah ldistilasi Aplikasi Universalitas metode Kjeldahl itu, presisi dan reproduksibilitas telah membuatmetode yang diakui secara internasional untuk memperkirakan
PROTEIN
kandungan protein dalam makanan dan itu adalah metode standar yang semua metode lain yang dihakimi. Hal ini juga digunakan untuk uji tanah, air limbah, pupuk Ini tidak, bagaimanapun, memberikan ukuran kandungan protein sejati, seperti mengukur nitrogen nonprotein selain nitrogen dalam protein. Hal ini dibuktikan dengan 2007 pet insiden makanan dan 2008 Cina Skandal susu bubuk, ketika melamin, bahan kimia kaya nitrogen, ditambahkan ke bahan baku untuk kandungan protein tinggi palsu. Juga, faktor koreksi yang berbeda diperlukan untuk protein yang berbeda untuk memperhitungkan sekuens asam amino yang berbeda. Kerugian tambahan, seperti kebutuhan untuk menggunakan asam sulfat pekat pada suhu tinggi dan waktu pengujian yang relatif lama (satu jam atau lebih), buruk dibandingkan dengan metode Dumas untuk mengukur kadar protein kasar.Total Kjeldahl nitrogen Jumlah Kjeldahl nitrogen atau TKN adalah jumlah nitrogen organik, amonia (NH3), dan amonium (NH4 +) dalam analisis kimia tanah, air, atau air limbah (misalnya pabrik pengolahan limbah limbah). Untuk menghitung total Nitrogen (TN), konsentrasi nitrat dan nitritN-N ditentukan dan ditambahkan ke TKN. Hari ini, TKN adalah parameter yang diperlukan untuk pelaporan peraturan di banyak pabrik pengolahan, dan sebagai sarana operasi pabrik pemantauan. Konversi faktor TKN sering digunakan sebagai pengganti untuk protein dalam sampel makanan. Konversi dari TKN protein tergantung pada jenis protein yang hadir dalam sampel dan apa fraksi protein yang tersusun dari asam amino nitrogen, seperti arginin dan histidin. Namun, berbagai faktor konversi relatif sempit. Contoh faktor konversi, yang dikenal sebagai faktor N, untuk makanan berkisar dari 6,38 untuk susu dan 6,25 untuk daging, telur, jagung (jagung) dan sorgum 5.83 untuk sebagian besar biji-bijian,. 5.70 untuk tepung terigu, dan 5,46 untuk kacang Metode kjeldahl adalah buruk sensitif dalam versi asli. Metode deteksi lainnya telah digunakan untuk mengukur NH4 + setelah mineralisasi dan distilasi, mencapai peningkatan sensitivitas, yaitu in-line generator pasangan hydrure ke spektrometer emisi plasma (ICP- AES-HG) (10-25 mg / L) [4], titrasi potensiometri (> 0,1 M Nitrogen), Zona Elektroforesis Kapiler (1,5 ug / ml Nitrogen)
PROTEIN
[5], kromatografi ion (0.5g/ml) . 2.1.2 Pengukuran Protein dan Metode yang Digunakannya Protein merupakan senyawa polimer organik yang berasal dari monomer asam amino yang mempunyai ikatan peptida. Istilah protein berasal dari bahasa Yunani "protos" yang memiliki arti "yang paling utama ".Protein" memilikiperan yang sangat penting pada fungsi dan struktur seluruh sel makhluk hidup. Hal ini dikarenakan molekul protein memiliki kandungan oksigen, karbon, nitrogen, hydrogen, dan sulfur.Sebagian protein juga menagndung fosfor. Kebanyakan protein merupakan enzim atau subunit enzim. Jenis protein lain berperan dalam fungsi struktural atau mekanis, seperti misalnya protein yang membentuk batang dan sendi sitoskeleton. Protein terlibat dalam sistem kekebalan (imun) sebagai antibodi, sistem kendali dalam bentuk hormon, sebagai komponen penyimpanan (dalam biji) dan juga dalam transportasi hara. Sebagai salah satu sumber gizi, protein berperan sebagai sumber asam amino bagi organisme yang tidak mampu membentuk asam amino tersebut (heterotrof). Metode Kjeldahl merupakan metode yang sederhana untuk penetapan nitrogen total pada asam amino, protein dan senyawa yang mengandung nitrogen. Sampel didestruksi dengan asam sulfat dan dikatalisis dengan katalisator yang sesuai sehingga akan menghasilkan amonium sulfat. Setelah pembebasan dengan alkali kuat, amonia yang terbentuk disuling uap secara kuantitatif ke dalam larutan penyerap dan ditetapkan secara titrasi. Metode ini telah banyak mengalami modifikasi. Metode ini cocok digunakan secara semimikro, sebab hanya memerlukan jumlah sampel dan pereaksi yang sedikit dan waktu analisa yang pendek. Metode ini kurang akurat bila diperlukan pada senyawa yang mengandung atom nitrogen yang terikat secara langsung ke oksigen atau nitrogen. Tetapi untuk zat-zat seperti amina,protein,dan lain - lain hasilnya lumayan. Cara Kjeldahl digunakan untuk menganalisis kadar protein kasar dalam bahan makanan secara tidak langsung, karena yang dianalisis dengan cara ini adalah kadar nitrogennya. Dengan mengalikan hasil analisis tersebut dengan angka konversi 6,25, diperoleh nilai protein dalam bahan makanan itu. Untuk beras,
PROTEIN
kedelai, dan gandum angka konversi berturut- turut sebagai berikut: 5,95, 5,71, dan 5,83. Angka 6,25 berasal dari angka konversi serum albumin yang biasanya mengandung 16% nitrogen. Prinsip cara analisis Kjeldahl adalah sebagai berikut: mula-mula bahan didestruksi dengan asam sulfat pekat menggunakan katalis selenium oksiklorida atau butiran Zn. Amonia yang terjadi ditampung dan dititrasi dengan bantuan indikator. Cara Kjeldahl pada umumnya dapat dibedakan atas dua cara, yaitu cara makro dan semimakro. 1.
Cara makro Kjeldahl digunakan untuk contoh yang sukar dihomogenisasi dan besar contoh 1-3 g
2.
Cara semimikro Kjeldahl dirancang untuk contoh ukuran kecil yaitu kurang dari 300 mg dari bahan yang homogen. Cara analisis tersebut akan berhasil baik dengan asumsi nitrogen dalam bentuk
ikatan N-N dan N-O dalam sampel tidak terdapat dalam jumlah yang besar. Kekurangan cara analisis ini ialah bahwa purina, pirimidina, vitamin-vitamin, asam amino besar, kreatina, dan kreatinina ikut teranalisis dan terukur sebagai nitrogen protein. Walaupun demikian, cara ini kini masih digunakan dan dianggap cukup teliti untuk pengukuran kadar protein dalam bahan makanan. Analisa protein cara Kjeldahl pada dasarnya dapat dibagi menjadi tiga tahapan yaitu proses destruksi, proses destilasi dan tahap titrasi. 1. Tahap destruksi Pada tahapan ini sampel dipanaskan dalam asam sulfat pekat sehingga terjadi destruksi menjadi unsur-unsurnya. Elemen karbon, hidrogen teroksidasi menjadi CO, CO2 dan H2O. Sedangkan nitrogennya (N) akan berubah menjadi (NH4)2SO4. Untuk mempercepat proses destruksi sering ditambahkan katalisator berupa campuran Na2SO4 dan HgO (20:1). Gunning menganjurkan menggunakan K2SO4 atau CuSO4. Dengan penambahan katalisator tersebut titk didih asam sulfat akan dipertinggi sehingga destruksi berjalan lebih cepat. Selain katalisator yang telah disebutkan tadi, kadang-kadang juga diberikan Selenium. Selenium dapat mempercepat proses oksidasi karena zat tersebut selain menaikkan titik didih juga
PROTEIN
mudah mengadakan perubahan dari valensi tinggi ke valensi rendah atau sebaliknya. Reaksi yang terjadi pada tahap ini adalah: H destruksi R-C-COOH NH3 + CO2 + H2O NH2 H2SO
http://elfianpermana010.wordpress.com/2013/04/24/mengukur-proteindengan-metode-kjeldahl/
PROTEIN
PROTEIN
PROTEIN
2.2.1 Protein Protein merupakan salah satu makronutrien. Protein tersusun atas asam amino yang berikatan satu sama lain melalui ikatan peptida dengan berbagai variasi dan membentuk suatu rantai panjang yang disebut polipeptida (Gaman dan Sherington, 1992). Protein berperan penting dalam penyusunan senyawa biomolekul yang dibutuhkan dalam proses biokimia tubuh (Sudarmadji et al., 2007). Salah satu metode analisis untuk menentukan kandungan protein ialah metode Kjeldahl. Metode ini memerlukan faktor konversi yang spesifik untuk bahan tertentu. Faktor konversi yang digunakan untuk bahan jamur ialah 4.38 (Chang dan Miles, 2004; Barros et al, 2008). Jamur merupakan pangan sumber protein yang baik. Kandungan protein jamur pangan yang dipanen dari alam lebih tinggi dibandingkan dengan jamur yang dibudidaya untuk kepentingan komersil (Barros et al., 2008). Jamur pangan ektomikoriza dari genus Boletus, Astreus, Craterellus, Heimiella, Lactarius, Phaegyroporus, dan Russula mengandung protein sebesar 14-25% bk (Sanmee et al., 2003; Manzi et al., 2004; Barros et al., 2008), dan kandungan protein pada jamur pangan non-ektomikoriza hasil budidaya seperti, Pleurotus ostreatus dan Lentinula edodes ialah 11 dan 12% bk (Reguła et al., 2007). Protein dapat digolongkan berdasarkan kelarutannya dalam berbagai pelarut (De Man, 1997). Golongan protein ialah : 1.
Albumin, yaitu protein yang larut dalam air netral yang tidak mengandung garam dan terkoagulasi oleh panas,
2.
Globulin, yaitu protein yang larut dalam larutan garam netral dan sedikit larut dalam air seperti glisin pada kedelai, serta terkoagulasi oleh panas,
3.
Glutelin, yaitu protein yang larut dalam asam/basa yang sangat encer dan tidak larut dalam pelarut netral,
4.
Prolamin, yaitu protein yang larut dalam alkohol 50-90% dan tidak larut dalam air,
PROTEIN
5.
Skleroprotein, yaitu protein yang tidak larut dalam air dan pelarut netral bahkan tahan terhadap hidrolisis memakai enzim,
6.
Histon, yaitu protein yang larut dalam air dan dapat diendapkan oleh ammonia, serta bersifat basa karena mengandung lisin dan arginin yang tinggi, dan
7.
Protamin, protein yang bersifat basa kuat dan berbobot molekul rendah.
Berdasarkan hasil penelitian Bauer-Petrovska (2001) mengenai fraksi protein pada 24 spesies jamur, diketahui komposisi albumin, globulin, glutelin-like material, glutelin, prolamin, dan prolamin-like material secara berurutan ialah 24.8, 11.5, 7.4, 11.5, 5.7, dan 5.3%.
PROTEIN
LEMBAR ASISTENSI
DIPERIKSA NO. 1.
TANGGAL 7 Juni 2014
TANDA
KETERANGAN
TANGAN
Perhatikan format, sesuaikan dengan panduan. Perhatikan margin. Cek tiap bab. Untuk kirim
p2 via
dan
seterusnya, email
[email protected]
ke
