LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA UJI KUALITATIF KARBOHIDRAT, PROTEIN, DAN LIPID Dosen Pengampu: Fitria Susilowati, S.Si, M.Si
Disusun Oleh: Desta Astarina Saputri Toasa 35.2014.71.1.0955
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS DARUSSALAM GONTOR 2017
BAB I PENDAHULUAN
I.
Latar belakang
Istilah biokimia telah dikemukakan oleh karl neuberg, seorang ahli kimia jerman pada tahun 1903, namun sekitar satu setengah abad sebelumnya, yaitu pada pertengahan Abad XVII karl Wilhelm Scheele seorang ahli kimia swedia telah melakukan penelitian mengenai susunan kimia jaringan pada tumbuhan dan hewan. Dengan adanya biokimia yang semakin berkembang dari zamanzaman,
akhirnya
para
tenaga
medis
dapat
melakukan
penelitian
laboratorium tentang masalah-masalah yang banyak ditemukan saat ini, yang diantaranya penelitian masalah gizi menghasilkan penemuan tentang vitamin yang dapat mencegah seseorang terkena penyakit tertentu. Dengan majunya pengetahuan tentang struktur dan sifat protein, telah diketahui bahwa enzim yang merupakan biokatalis bagi reaksi yang terjadi dalam tubuh adalah suatu protein. Selain itu perkembangan atau kemajuan metode analisis kromatografi, penemuan antara metabolism karbohidrat, lemak, dan protein merupakan salah satu bentuk akan perkembangan biokimia saat ini. Beberapa materi Praktikum yang telah diuji praktekan mulai dari uji kualitatif karbohidrat dan protein, dan pengujian lipid dalam rangka melengkapi materi kuliah biokimia di semester 3 ini. Yang pada umunya bertujuan menambah ilmu dan pengetahuan pengetahuan mengenai penelitian-penelitian yang sangat penting bagi kita sebagai calon-calon tenaga medis. Dan semoga kita dapat mengamalkan semua ilmu yang kita miliki agar bermanfaat bagi semua pihak dan mendapat berkah dari Allah SWT. Amin. Amin.
II.
Tujuan
1. Mampu melakukan uji kualitatif karbohidrat pada suatu sampel 2. Mampu membedakan jenis karbohidrat berdasarkan uji khasnya 3. Mampu melakukan berbagai uji kualitatif protein 4. Mampu mengenal reaksi-reaksi umum asam amino ami no penyusun protein 5. Mengetahui jenis pelarut terhadap sifat kelarutan lemak 6. Mengetahui tingkat ketidakjenuhan berbagai jenis lemak
BAB II DASAR TEORI
Karbohidrat adalah biomolekul yang paling berlimpah di bumi. Suatu komponen yang tersusun atas polihidroksi aldehid atau polihidroksi keton dengan rumus empiris CnH2On. Glukosa merupakan merupakan salah satu contoh dari karbohidrat yang tersususn atas gugus aldehid, sedangkan fruktosa merupakan contoh karbohidrat yang tersusun atas gugus keton. Secara umum karbohidrat dikelompokkan berdasarkan jumlah monomernya,
yaitu
monosakarida,
disakarida,
oligosakarida
dan
polisakarida. Monosakarida merupakan golongan karbohidrat yang tidak dapat dihidrolisis
menjadi
karbohidrat
yang
lebih
sederhana,
dapat
diklasifikasikan sebagai triosa, tetrosa, pentose, hektosa, atau heptosa. Disakarida adalah produk kondensasi dari dua unit monosakarida, contohnya adalah maltosa, sukrosa, dan laktosa. Oligosakarida adalah polimer yang tersusun t ersusun atas 2-10 unit monosakrida yang dihubungkan oleh ikatan glikosidik, contohnya adalah maltotriosa. Polisakarida merupakan polimer yang tersusun lebih dari 10 nit monosakarida. Polisakarida banyak ditemukan pada bahan pangan pokok dan memberikan sifat tekstural pada bahan pangan. Karbohidrat memberi kontribiusi pada stuktur sel hewan dan mikroorganisme, terutama tanaman. Disamping menyediakan energi biokimia sebagai penopang proses kehidupan serta sert a perkembangbiakannya. Pada dasarnya energi yang terkandung dalam karbohidrat berasal dari energi matahari. Karbohidrat (glukosa) dibentuk dari karbondioksida dan air dengan bantuan sinar matahari dan klorofil dalam daun. Kemudian glukosa yang terbentuk dibentuk dalam amilum. Proses di atas disebut proses fotosintesis. Karbohidrat sangat beranekaragam sifatnya. Misalnya, sukrosa (gula pasir) dan kapas, keduanya adalah karbohidrat. Salah satu perbedaan.
utama antara pelbagai tipe karbohidrat ialah ukuran molekulnya. Monosakarida (sering disebut gula sederhana) adalah satuan karbohidrat Yang tersederhana; mereka takdapat dihidrolisis menjadi molekul karbohidrat yang lebih kecil. Sukrosa adalah suatu disakarida yang dapat dihidrolisis menjadi satu satuan. glukosa. dan satu satuan. fruktosa. Monosakarida dan disakarida larut dalam air dan umumnya terasa manis. Protein berasal dari kata yunani “proteios” yang berarti tempat pertama. Beberapa protein berperan untuk mempercepat reaksi kimia, sementara yang lainnya berperan untuk mendukung struktur, transportasi sel, komunikasi sel, pergerakan sel, dan pertahanan dari substansi asing (Campbell dan Reece, 2015). Protein merupakan makromolekul terbanyak yang dapat ditemui dalam sel hidup, yang merupakan komponen penting dan utama untuk sel hewan dan sel manusia. Protein dapat diisolasi dari seluruh sel ke bagian sel. Dalam hal ini, protein mempunyai peranan penting dalam biologi yang sangat penting, sebagai zat pembenfuk, transport, katalisataor reaksi kimia, hormon, racun, dan yang lainnya. Protein ini mempunyai empat fungsi utamanya yaitu untuk memperbaiki jaringan yang rusak untuk pertumbuhan jaringan baru, sebagai enzim, dan sebagai hormone . (Mandle, (Mandle, 2012). Protein adalah polimer yang terdiri dari asam amino, dimana setiap resude asama amino berikatan satu dengan yang lainnya melalui ikatan kovalen. Protein dapat dipecah (di hidrolisis) menjadi asam amino penyusunnya dengan beberapa beberapa cara. Ada 20 macam penyusun penyusun protein, asam amino tersebut meamiliki gugus karboksil dan gugus amnio yang berikatan pada atom yang sama. Asama amino dapt dibedakan menjadi 5 kelas berdasarkan sifat dari gugus R yang dimilikinya. Kelas pertama yaitu nonpolar, gugus R alifatik, contohnya alanin, valin, leusin, isoleusin, glisin, metionin, dan prolin. Kelas kedua adalah gugus R 7ormone7 seperti fenilanin, tirosin, dan triptofan. Kelas ketiga adalah polar, gugus R tidak bermuatan, contohnya adalah serin, treonin, sistein, asparagin, dan glutamine. Kelas keempat adalah asam amino yang memiliki gugus R
bermuatan positif, contohnya contohnya adalah lisin, arginin, dan histidin . kelas kelima adalah asam amino yang memiliki gugus R negative, contohnya aspartat dan glutamate (Nelson and Cox, 2004). Lipid adalah salah satu kelompok senyawa yang terdapat pada tumbuhan, heawan atau manusia dan sangat berguna bagi kehidupan manusia. Lipid adalah senyawa organik yang tidak larut dalam air ta pi dapat diekstraksi dengan pelarut non polar seperti khloroform, eter, benzena, alcohol, aseton, dan karbondisulfid. Beberapa fungsi lipid (lemak) yaitu sebagai alat angkut vitamin larut lemak, menghemat protein, memberi rasa kenyang, sebagai pelumas, memelihara suhu tubuh, dan sebagai pelindung organ tubuh. Dimana fospolipid berfungsi untuk membentuk membrane sel. Dan kolestrol berfungsi sebagai komponen esensial membrane structural semua sel yang merupakan komponen utama sel otak dan saraf (Almatsier, 2004). Senyawa yang termasuk lipid dibagi dalam beberapa golongan yaitu lipid sederhana, lipid majemuk dan lipid turunan. Lipid sederhana yaitu ester asam lemak dengan berbagai alkohol, contohnya lemak atau gliserida dan lilin (waxes). Lipid gabungan/ majemuk yaitu ester asam lemak yang mempunyai gugus tambahan, contohnya fosfolipid dan serebrosida. Derivate lipid (lipid turunan) yaitu senyawa yang dihasilkan dari proses hidrolisis lipid, contohnya asam lemak, gliserol, dan sterol. Klasifikasi lipid menurut fungsi biologiknya dalam tubuh terbagi menjadi dua, yaitu: 1) lemak simpanan yang terutama terdiri atas trigliserida yang disimpan dalam depot-depot jaringan tumbuhan dan hewan. 2) lemak strutural yang terutama terdiri atas fosfolipida dan kolestrol (Almaitser, 2004). Lipid merupakan salah satu kelompok senyawa organik yang terdapat dalam tumbuhan, hewan dan manusia dan sangat berfungsi bagi manusia. Beberapa fungsi lipid yaitu sebagai alat angkut vitamin larut lemak, mengehmat protein, memberi rasa kenyang, sebagai pelumas, memelihara suhu tubuh, dan pelindung organ tubuh. Fosfolipida berfungsi untuk membentuk membran sel.(Almatsier, 2004).
BAB III METODOLOGI I.
Alat dan bahan
Alat:
Tabung reaksi
6 buah
Gelas ukur 5 ml
2 buah
Gelas beker 150 ml
3 buah
Gelas ukur100 ml
1 buah
Spatula
1 buah
Pipet tetes
1 buah
Bunsen
1 buah
Bahan:
Aquades
Larutan amilum
Larutan glukosa
Larutan sukrosa
Larutan nasi
Larutan etanol 1 ml
Reagen molisch 10 tetes
Reagen benedict 25 tetes
Reagen selliwanof 25 ml
Larutan iodium 15 tetes
Larutan HCl
1 butir telur
Reagen nihidrin
Reagen biuret A &B
Minyak kelapa / biasa
Minyak jelantah
II.
Prosedur kerja 1. Uji kualitatif karbohidrat
1) Uji Molisch Glukosa, sukrosa, amilum, nasi, aquades
Masukkan 1 ml sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi) kedalam tabung reaksi yang berbeda
Masukkan 1 ml aquades kedalama tabung reaksi lainnya sebagai kontrol
Tambahkan 2 tetes reagen molisch
Tambahkan 3 ml larutan HCl melalui dinding tabung secara perlahan
Amati perubahan warna yang terjadi
Nasi = putih keruh, Amilum = terdapat cincin ungu, Sukrosa = partikel ungu, Glukosa = putih berpartikel, Aquades = putih beningbening.
2) Uji selliwanof
Glukosa, sukrosa, amilum, nasi, aquades
Masukkan 2-3 tetes sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi dan aquades) sebagai control kedalam tabung reaksi yang berbeda-beda
Tambahkan 5 ml larutan resorsinol (reagen selliwanof)
Tempatkan tabung-tabung reaksi dalam air mendidih dengan posisi sejajar
Amati dan catat perubahan setiap tabung setelah 14 menit
Sukrosa melakukan perubahan yang paling baik karena berwarna merah bata
3) Uji benedict
Glukosa, sukrosa, amilum, nasi, aquades
Masukkan 1 ml sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi) kedalam tabung reaksi yang berbeda
Masukkan 1 ml aquades kedalam tabung reaksi lainnya sebagai kontrol
Tambahkan 5 tetes reagen benedict ke dalam masing-masing tabung reaksi
Panaskan larutan, dan amati perubahan yang terjadi
Sukrosa = endapan merah bata, nasi = sedikit endapan kuning, glukosa = endapan merah bata, aquades = tidak terdapat endapan, amilum = sedikit endapan kuning
4) Reaksi iodium
Glukosa, sukrosa, amilum, nasi, aquades
1 ml dari masing-masing sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi) dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berbeda
Tambahkan 2-3 tetes larutan iodium/lugol
Panaskan tabung reaksi dalam hingga mendidih
Dinginkan kembali tabung reaksi dalam air dingin
Amati dan catat perubahan yang terjadi
Glukosa = berwarna ungu muda, sukrosa = bening kekuningan, amilum = biru tua, nasi = putih, aquades = kuning.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil pengamatan 1. Uji kualitatif karbohidrat
1) Uji molisch No
Sampel karbohidrat
Hasil
Cincin ungu
1.
Glukosa
Berwarna putih berpartikel
_
2.
Sukrosa
Terbentuk partikel ungu
+
3.
Amilum
Terbentuk cincin ungu
+
4.
Nasi
Berwarna putih keruh
_
5.
Aquades
Berwarna putih bening
_
2) Uji benedict No
Sampel karbohidrat
Hasil
Endapan merah bata
1.
Glukosa
Endapan merah bata
+
2.
Sukrosa
Sedikit endapan merah bata
+
3.
Amilum
Sedikit endapan kuning
-
4.
Nasi
Sedikit endapan kuning
-
5.
Aquades
Tidak terdapat endapan
-
3) Uji iodium No
Sampel karbohidrat
Hasil
Biru tua
1.
Glukosa
Ungu muda
+
2.
Sukrosa
Putih
-
3.
Amilum
Biru tua
+
4.
Nasi
Kuning
-
5.
Aquades
Bening kekunian
-
4) Uji selliwanof No
Sampel karbohidrat
Hasil
Merah tua
1.
Glukosa
Jingga gelap
-
2.
Sukrosa
Merah tua
+
3.
Amilum
Peach tua
-
4.
Nasi
Peach muda
-
5.
Aquades
Tidak ada perubahan
-
No
Sampel karbohidrat karbohid rat
Menit 1
Menit 2
Menit 3
Menit 4
1.
Glukosa
-
Peach muda
Peach tua
Jingga gelap
2.
Sukrosa
-
Merah
Merah gelap
Merah bata tua
3.
Amilum
-
-
-
Peach muda
4.
Nasi
-
-
Peach muda
Peach muda
5.
Aquades
-
-
-
-
2. Uji kualitatif protein
1). Uji nihidrin No
Bahan uji
Hasil
1.
Telur
Berwarna ungu tua
2.
Nasi
Berwarna ungu kebiruan
No
Bahan uji
Hasil
1.
Telur
Coklat keabu-abuan
2.
Nasi
Coklat dengan endapan coklat tua
2). Uji biuret
3). Pengendapan dengan etanol No
Bahan uji
Hasil 1
Hasil 2
1.
Nasi
Sedikit endapan putih
Sedikit endapan putih
2.
Putih telur
Endapan putih kekuningan
Endapan putih melayang
3. Pengujian lipid 1). Uji kelarutan No
Pelarut
Minyak biasa
Minyak jelatah
1.
Aquades
Tidak larut
Tidak larut
2.
Klroform
Homogen/ larut
Homogen/ larut
3.
Etanol
Tidak larut /endapan di atas
Tidak larut/ endapan
2). Uji ketidak jenuhan No
Sampel
Hasil 1 (iodium)
Hasil 2 (kloroform) (kloroform)
1.
Minyak biasa
Tidak jenuh
Jenuh
2.
Minyak jelata
Jenuh
Tidak jenuh
B. Pembahasan
Pada praktikum kali ini para praktikan melakukan percobaan mengenai uji kualitatif karbohidrat, protein dan lipid. Uji ini dilakukan untuk mengetahui adanya kandungan karbohidrat, protein dan lipid yang terdapat dalam sampel dengan melakukan uji dengan larutan yang disediakan. Pengujian kualitatif karbohidrat, protein dan lipid terhadap dilakukan secara berurutan. Hal pertama yang dilakukan adalah uji kualitatif karbohidrat dengan uji molish, benedict, selliwanof, dan iodium. Pada percobaan uji molish, sampel yang digunakan adalah glukosa, sukrosa, amilum, nasi, dan akuades. Semua sampel dimasukkan kedalam tabung reaksi yang berbeda-beda sebanyak 1 ml
kemudian diteteskan 2 tetes reagen molish dan 3 ml la rutan HCl melalui dinding tebung secara perlahan. Hasil yang didapat adalah perubahan warna pada sampel yang berbeda beda. Dimana berdasarkan hasil yang didapat menunjukkan bahwa semua sampel yang diuji mengandung karbohidrat yang mana seharusnya semua sampel berbentuk cincin berwarna ungu kecuali akuades untuk menunjukkan bahwa sampel yang diujikan mengandung karbohidrat (glukosa, sukrosa, amilum, nasi) hal ini terjadi karena adanya kesalahan dari awal pada sampel. Seharusnya semua sampel dipanaskan terlebih dahul sebelum diujikan. Uji molish pada larutan karbohidrat yang ditetesi larutan molish dan selanjutnya dihidrolisis dengan HCl pekat ini menjadikan pemutusan ikatan glikosidik dari rantai karbohidrat polisakarida dan menjadi disakarida dan monosakarida. Larutan yang bereaksi positif akan memberikan cincin berwarna ungu ketika direaksikan dengan molish dan larutan HCl pekat. Cincin ungu pada glukosa glukosa terdapat lebih banyak karena merupakan monsakarida. Sedangkan amilum adalah polisakarida dan sukrosa adalah disakarida. Hal kedua adalah uji karbohidrat dengan larutan benedic pada 5 sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi, dan akuades) uji ini bertujuan untuk mengidentifikasi gula pereduksi dengan menguji larutan karbohidrat 1 ml set iap sampel ditabung reaksi dan ditambahkan 5 tetes reagen benedict pada masingmasing tabung reaksi yang kemudian dipanaskan. Hasil yang didapat yaitu sukrosa dan glukosa terdapat endapan merah bata. Hal ini menunjukkan adanya kecepatan mereduksi dari sukrosa dan glukosa yang karena mempunyai moralitas yang tingg, sedangkan amilum, nasi dan akuades hanya terdapat sedikit endapan kuning. Ketiga adalah uji karbohidrat dengan larutan iodium pada sampel. Uji ini bertujuan untuk mengetahui adanya gugus keton dalam sampel. Karbohidrat yang mengandung gugus keton jika direaksikan dengan selliwanof akan menunjukkan warna merah sebagai reaksi positifnya. Adanya warna merah ini merupakan hasilkondensasi dariresorsinol yang sebelumnya didahului dengan
pembentukkan hidroksi metil furfural. Uji selliwanof digunakan untuk membedakan antara karbohidrat yang mengandung aldehid dan keton. Uji selliwanof dilakukan dengan memasukkan 5 ml larutan/ reagen selliwanof kedalam 5 tabung rekasi yang berisi 2-3 tetes sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi, dan akuades). Kemudian dipanaskan dengan bunsen. Hasil yang didapat yaitu glukosa dan sukrosa cepat bereaksi karena keduanya merupakan jenis karbohidrat yang memiliki gugus keton (ketosa). Ketosa bila didehidrasi oleh pereaksi selliwanof memberikan turunan furfural selanjutnya berkondensasi dengan resoroinol memberikan warna merah (kuning +) komplek. Dari percobaan yang dilakukan dapat dis impulkan bahwa glukosa dan sukrosa adalah karbohidrat yang mengandung gugus fungsi keton yang bisa cpat bereaksi dengan dengan selliwanof. Sedangkan amilum dan nasi bereaksi dimenit 3 dan 4 hal begitu pula dengan akuades yang tidak yang tidak bereaksi karena sampel-sampel ini menunjukkan tidak adanya kandungan gugus fungsi keton. Keempat adalah uji iodium yang prinsipnya dilakukan untuk mendeteksi adanya polisakarida pada sampel. Prosedur kerjanya dengan car a memasukkan 1 ml sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi, dan akuades) kedalam tabung reaksi yang berbeda.
Dan tambahkan 2-3 tetes larutan iodium kemudian
panaskan hingga mendidih diatas bunsen bunsen dan terakhir dinginkan dinginkan kembali tabung reaksi dalam air dingin. Hasilnya yaitu amilum berwarna biru tua hal ini menunjukkan adanya reaksi positif uji iodium pada sampel. Glukosa menjadi warna ungu muda, hal ini menunjukkan adanya reaksi positif uji iodium pada sampel. Amilum, sukrosa, dan akuades menghasilkan warna putih dan kuning/ bening hal ini menunjukkan menunjukkan reaksi negatif uji iod pada sampel. Uji kualitatif protein dilakukan dengan uji nihidrin, uji biure A dan B, serta pengendapan dengan etanol. Sampel yang digunakan adalah larutan nasi dan putih telur. Berikut penjelasannya: a. Uji nihidrin Uji nihidrin dipakai untuk menetapkan kualitatif asam amino. Hal yang dilakukan adalah memasukkan larutan asam amino (nasi dan putih
telur) kedalam tabung reaksi sebanyak 1 ml dan tambahkan 1 ml nihidrin. Kemudian panaskan diatas bunsenselama tiga menit. Hasilnya putih telur berwarna ungu tua sedang nasi berwarna ungu kebiruan. Hal ini menunjukkan adanya protein atau asam amino karena terbentukya warna ungu pada bahan uji/ sampel. Uji nihidrin ini bertujuan untuk menguji ada atau tidaknya protein dalam suatu senyawa dengan penambahan reagen nihidrin yang akan membentuk senyawa komplek berwarna ungu. b. Uji biuret A dan B Tujuan dari uji ini untuk menguji kualitatif protein berdasarkan reaksi warna. Prinsip uji biuret adalah ikatan peptida dapat membentuk senyawa komplek atau sederhananya uji biuret dilakukan untukmengetahui adanya ikatan peptida dalam protein. Pengujiannya yaitu dengan memasukkan 1 ml sampel (nasi, kuning telur) ketabung reaksi yang berbeda dan tambahkan 5 tetes reagen biuret A dan reagen biuret B, kemudian panaskan selama se lama 2 menit. Hasilnya adalah adal ah sampel putih telur membentuk coklat muda ke abu-abuan dan nasi berwarna coklat dengan endapan coklat tua. Hal ini menunjukkan tidak adanya ikatan peptida pada bahan uji karena menurut sastromidjojo (2009), dalam uji biuret larutan protein dibuat dengan menambahkan NaOH dan reagen biuret sehingga membentuk warna ungu karena positif positif memiliki ikatan peptida. Sedangkan hasil yang didapat dari ini yaitu tidak adanya warna ungu. Hal ini disebabkan oleh karena larutan yang dipakai seharusnya NaOH namun nyatanya reagen biuret A dan B sebagai ganti dari NaOH. c. Pengendapan dengan etanol Uji ini dilakukan untuk mengendapkan protein dengan penambahan etanol. Penambahan etanol kedalam larutan protein akan menyebabkan berkurangnya larutan protein dalam rangka mengendapkan protein dengan etanol hal yang dilakukan pertama kali yaitu memasukkan 1 ml sampel (nasi, putih telur) kedalam tabung reaksi yang berbeda dan ditambahkan 1 spatula kristal Nacl serta 1 ml etanol 96% kemudian tabung reaksi berisi sampel dan larutan diamati. Hasil pertama yang terjadi pada sampel nasi adalah yaitu sedikit endapan putih. Sedangkan pada putih telur terbentuk
endapan putih melayang kekuningan. Kemudian sebagian larutan dan endapannya dipindahkan ketabung reaksi lain dan ditambahkan 10 tetes aquades diambil dan dikocok. Hasil kedua pada nasi yaitu terbentuknya sedikit endapan putih dan pada telur terdapat endapan putih melayang. Pengujian lipid dilakukan dengan cara uji kelarutan dan uji ketidak jenuhan. Sampel yang digunakan yaitu minyak biasa, minyak jelatah, akuades, etanol, dan kloroform. Pengujian lipid dilakukan dengan uji kelarutan terlebih dahulu kemudian dilanjutkan dengan uji ketidak jenuhan. a. Uji kelarutan Tujuan dari uji kelrutan adalah untuk mengetahui adanya kelarutan pada sampel yang digunakan juga larut atau tidaknya sampel didalam pelarut yang disediakan. Cara kerjanya yaitu pertama, masukkan 2 ml akuades, 2 ml etanol, dan 2 ml kloroform kedalam 3 tabung reaksi yang berbeda kemudian teteskan minyak biasa sebanyak 10 tetes. Hasilnya minyak biasa pada akuades tidak larut, sedang pada klorofor minyak biasa menjadi larut (homogen), dan pada etanol minyak biasa tidak homogen dan terdapat endapan dibawah. Kemudian percobaan kedua, cara kerjanya diulang lagi yaitu masukkan 2 ml akuades, 2 ml etanol, dan 2 ml kloroform yang kemudian ditambahkan minyak jelatah sebanyak 10 tetes. Dan hasilnya yaitu minyak jelatah pada akuades tidak larut namun mengendap dipermukaan, pada kloroform hasilnya homogen, sedangkan pada etanol minyak jelatah tidak homogen dan terdapat endapan dibawah. b. Uji ketidak jenuhan Uji ketidakjenuhan digunakan untuk mengetahui asam lemak yang diuji akan termasuk asam lemak jenuh atau tidak jenuh dengan menggunakan pereaksi iodium. Iodium digunakan sebagai indikator perubahan. Pelaksanaannya yaitu dengan cara memasukkan 1 ml minyak biasa dan jelatah kedalam tabung reaksi yang berbeda. Kemudian ditambahkan 3 tetes larutan iodium dan diamati. Hasilnya minyak biasa menjadi larut dengan adanya iodium yang berarti sifat tidak jenuh. Sedang
minyak jelatah tidak larut dengan adanya iodium yang berarti sifatnya jenuh. Setelah itu dilanjutkan dengan menambahkan 1 ml kloroform ke hasil larutan yang telah diuji dengan iodium hingga menimbulkan perubahan lain yaitu minyak biasa menjadi jenuh, dan jelatah jadi tidak jenuh.
BAB V PENUTUP A. Kesimpulan Uji kualitatif karbohidrat pada sampel (glukosa, sukrosa, amilum, nasi, dan akuades) dilakukan dengan uji molish, benedict, selliwanof, dan reaksi iodium secara berturut-turut. Pada uji molish, amilum memeiliki perubahan warna paling baik karena membentuk cincin ungu. Amilum merupakan polisakarida. Pada uji benedic, glukosa mengalami perubahan warna paling baik yang membentuk endapan merah bata sedangkan pada uji selliwanof sukrosa mengalami perubahan paling baik yang sudah bereaksi dimenit ke 2 dan akhirnya berwarna merah tua. Kemudian pada uji iodium hasil paling baik pada amilum karena berwarna biru tua s edangkan lainnya berwarna ungu dan bening kuning. Uji kualitatif protein pada sampel (nasi, putih telur) dilakukan dengan uji nihidrin, biuret A dan B, serta pengendapan dengan etanol 96%. Pada uji nihidrin memberikan perubahan pada nasi yang berwarna ungu tua dan nasi berwarna ungu kebiruan. Selanjutnya pada uji biuret hasil yang didapat yaitu perubahan pada nasi yang berwarna coklat muda keabu-abuan, dan putih telur yang berwarna ungu coklat dengan endapan coklat tua. Terakhir pengendapan dengan etanol 96% hasil pertama yang didapat yaitu nasi membentuk sedikit endapan putih. Putih telur membentuk endapan putih melayang kekuningan. Hasil kedua yaitu nasi membentuk sedikit endapan putih dan telur membentuk endapan putih melayang. Pengujian lipid pada sampel (minyak biasa, minyak jelatah) dan pelarut (akuades, etanol, dan kloroform) dilakukan dengan uji kelarutan dan uji ketidakjenuhan. Hasil dari uji kelarutan yaitu minyak biasa pada akuades tidak larut, pada kloroform menjadi larut, dan pada eta nol menjadi tidak larut terdapat endapan dibawah. Sedangkan minyak jelatah pada akuades menjadi tidak larut dan terdapat endapan dipermukaan, lalu pada kloroform menjadi larut (homogen), sedangkan pada etanol tidak larut dan terdapat endapan dibawah.
DAFTAR PUSTAKA Almatrier. S. 2010. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta; Gramedia pustaka utama. Anggorodi, H, R. 1995. Nutrisi Aneka Ternak Unggas. Jakarta ; PT Gramedia pustaka utama. Bintang M. 2010. Biokimia Teknik Penelitian. Jakarta ; penerbit Erlangga. Budha, k. 1981. Kelapa dan Hasil Pengolahannya. Fakultas Teknologi dan Pertanian, Denpasar ; Universitas Udayana. Garjito, M. 1980. Minyak; Sumber, Penanganan, Pengelolahan, dan Pemurnian. Yogyakarta ; Fakultas Teknologi Pertanian UGM. Hala, Yusmina dan Hartono. 2011. Penentuan Biokimia Umum. Makssar; Jurusan Biologi FMIPA UNM. Harper, et al. 19979. Biokimia Harper. Jakarta; EGC Hermanto, S. 2012. Petunjuk Praktikum Biokimia 1. Jakarta; UIN syahid Murray, et al. 2003. Biokimia Harper Edisi 25 (Ahli bahasa Andry. Hartono). Jakarta ; Penerbit EGC.. Nelson DI, cox MM. 2004. Lehninger’s Principles Of Biochemistry. 4 th ed. U. S. A; W.H.Freeman.
